ĐỊNH LƯỢNG CEFALEXIN TRONG HUYẾT TƯƠNG LỢN BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO

 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) với detector UV (260 nm) được xây dựng và thẩm định để định lượng cefalexin trong huyết tương lợn, sử dụng cefaclor làm chất nội chuẩn. Sau khi kết tủa protein trong huyết tương bằng axít tricloroacetic, CEP và chất nội chuẩn được phân tách với điều kiện sắc ký sau: cột Phenomenex Gimini C18 (5  m,  250 x 4 mm) ở 400C, với pha động ACN:K2HPO4 0,01M pH 7,0 (15/55, v/v), tốc độ 1,0 ml/phút. Phương pháp phân tích có giới hạn định lượng < 0,5 µg/ml, với RSD < 2%; khoảng tuyến tính 0,5 – 25 µg/ml, độ chính xác trong ngày và khác ngày lần lượt là 1,7 – 4,9% và 3,6 – 5,8%; độ đúng trong ngày và khác ngày lần lượt là 96,9 – 112,9% và 85,9 –  113,1%. Phương pháp phân tích đã xây dựng có thể được sử dụng trong nghiên cứu sinh khả dụng và tương đương sinh học của cefalexin trên lợn thực nghiệm.Cefalexin (CEF) là kháng sinh nhómcephalosporin thế hệ 1. Đây là kháng sinh phổ rộng, được ra đời từ những năm 1970, nhưng vẫn được sử dụng rộng rãi trong điều trị nhiễm khuẩn thông thường. CEF có thời gian bán thải ngắn (0,5  –  1giờ), tác dụng 6  –  8 giờ nên phải sử dụng nhiều lần trong ngày (4 lần) để đạt được hiệu quả điều trị. Đã có một số nghiên cứu được công bố về xây dựng phương pháp định lượng CEF và các hoạt chất khác trong huyết tương động vật thí nghiệm khác nhau như thỏ, chó [1]. Thử nghiệm trên những động vật này có ưuđiểm tiết kiệm chi phí, dễ triển khai thực hiện. Tuy nhiên, khi triển khai thí nghiệm phải lấy nhiều máu (nhiều thời điểm khác nhau) trên thỏ và chó dễ làm thay đổi huyết động học và kéo dài thời gian phục hồi thể trạng trong nghiên cứu chéo  nghiên cứu sinh khả dụng (skd) và tương đương sinhhọc (tđsh) trên lợn có nhiều ưu điểm như: có thể lấy máu nhiều lần mà ít làm thay đổi huyết động học, nhanh chóng phục hồi thể trạng để triển khai nghiên cứu nhiều lần tiếp theo [5].  ở việt nam, nghiên cứu  về skd/tđsh còn ít được triển khai trên lợn. vì vậy , chúng tôi tiến hành nghiên cứu “định lượng cefalexintrong huyết tương lợn bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao” để góp thêm phương pháp trong đánh giá skd/tđsh, đặc biệt với những thuốc giải phóng kéo dài.