BIỂU HIỆN KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG KHÁNG SARS-CoV-2 TRÊN DÒNG TẾ BÀO CHO (CHINESE HAMSTER OVARY)

BIỂU HIỆN KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG KHÁNG SARS-CoV-2 TRÊN DÒNG TẾ BÀO CHO (CHINESE HAMSTER OVARY)
Trần Thảo Vi1, Đỗ Quang Huy1, Nguyễn Việt Anh1, Hứa Hoàng Quốc Huy1
Cao Thị Bằng Giang1, Huỳnh Văn Chung1, Nguyễn Thị Thu Mỹ1, Cao Minh Ngọc1
Y Lim Niê1, Nguyễn Thị Thùy Trang1, Trịnh Thanh Hùng4, Đỗ Quyết2
Hoàng Văn Lương2, Nguyễn Trường Giang2, Đỗ Minh Trung3, Bruce May1
Đoàn Chính Chung1, Hồ Nhân1, Đỗ Minh Sĩ1
TÓM TẮT
Mục tiêu: Biểu hiện được kháng thể đơn dòng kháng Sars-CoV-2 trên dòng tế bào CHO (Chinese Hamster Ovary). Đối tượng và phương pháp: Trình tự mã hóa chuỗi nặng và chuỗi nhẹ của kháng thể đơn dòng CB6 kháng SARS-CoV-2 được lấy từ cơ sở dữ liệu GenBank có mã số lần lượt là QJU69682.1 (DBSOURCE accession MT470197.1) và QJU69681.1 (DBSOURCE accession MT470196.1). Nghiên cứu sử dụng công nghệ protein tái tổ hợp để biểu hiện phân tử kháng thể CB6, được phân lập từ bệnh nhân (BN) COVID-19 đã hồi phục và có khả năng ức chế sự tương tác giữa protein gai S trên virus SARS-CoV-2 và thụ thể ACE-2 trên tế bào phổi người. Trình tự mã hóa cho chuỗi nặng và chuỗi nhẹ của kháng thể CB6 được dòng hóa bằng các công cụ sinh học phân tử vào vector biểu hiện protein trên động vật có vú pNANOGEN để biểu hiện trên tế bào CHO. Kết quả: 2/114 dòng tế bào đơn có khả năng sản xuất lần lượt 732.87 µg/ml và 406.67 µg/ml được chọn cho nghiên cứu sản xuất quy mô lớn. Mẫu tinh chế chứa 97,82% kháng thể CB6 có hiệu quả trung hòa in vitro 86% tương tác giữa vùng bám thụ thể SARS-CoV-2 RBD và ACE-2. Kết luận: Đã biểu hiện thành công phân tử IgG1 CB6 kháng SARS-CoV-2 với khả năng bám đặc hiệu với phân tử RBD của SARS-CoV-2 và có hoạt tính trung hòa SARS-CoV-2 in vitro thông qua sự ngăn cản tương tác giữa RBD và ACE-2.