Các đột biến dòng mầm tại vùng nóng của gen APC ở các bệnh nhân ung thư đại trực tràng thể đa Polyp tuyến gia đình

Các đột biến dòng mầm ở gen ức chế khối u APC (tumor – supresor adenomatous polyposis coli gen: APC) là nguyên nhân của hầu hết các trường hợp đa polyp tuyến gia đình (hereditary familial adenomatous polyposis: FAP) [5, 9]. Đa polyp tuyến gia đình là một rối loạn di truyền trội của nhiễm sắc thể thường (autosomal dominant inher- ited disorder) chiếm khoảng 1% các ung thư đại tràng nói chung. Đa polyp tuyến gia đình được đặc trưng bởi từ hàng trăm đến hàng nghìn các

polyp tuyến trong đại trực tràng và có khả năng tiến triển thành ung thư đại trực tràng [9]. Do đó, việc chẩn đoán sớm đa polyp tuyến gia đình ở những thành viên trong gia đình có nguy cơ là rất quan trọng để ngăn ngừa sự phát triển của ung thư. Nhờ nghiên cứu sàng lọc các thành viên gia đình bị đa polyp tuyến gia đình, người ta đã phát hiện hơn 300 đột biến dòng mầm khác nhau ở gen APC. Khoảng 95% các đột biến dịch chuyển và vô nghĩa gây nên sự cắt ngắn các protein APC [5, 9]. Sự mất chức năng các protein APC làm chúng không có khả năng ức chế sự phát triển của ung thư đại trực tràng. Mục tiêu:

Phát hiện các đột biến dòng mầm trong vùng nóng của gen APC ở các bệnh nhân ung thư đại trực tràng thể đa polyp tuyến gia đình ở Việt Nam.

I. ĐỐI   TƯỢNG   VÀ   PHƯƠNG   PHÁP NGHIÊN CỨU

1. Đối tượng nghiên cứu

Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã phân tích gen APC ở vùng nóng ở 21 bệnh nhân ung thư đại trực tràng thể đa polyp tuyến gia đình, gồm 15 nam và 6 nữ, tuổi từ 18 – 62, đã được xác định bằng lâm sàng và giải phẫu bệnh.

2. Phương pháp nghiên cứu

Trong nghiên cứu này, các kỹ thuật sinh học phân tử như tách chiết DNA từ bạch cầu máu ngoại vi, khuếch đại DNA bằng PCR và xác định trình tự DNA đã được sử dụng.

– Chiết xuất DNA: DNA được chiết xuất  từ các bạch cầu của máu ngoại biên bằng  Phenol/ Chloroform. Độ tinh sạch của sản  phẩm DNA được kiểm tra trên máy quang  phổ  ở bước sóng 260/280 nm.