Chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng cơ duchenne trên tế bào ối bằng phương pháp multiplex pcr

DMD là bệnh di truyền lặn liên kết nhiễm sắc thể X, do đột biến gen dystrophin, đột biến  mất đoạn là phổ biến.  Mục tiêu:hoàn chỉnh phương pháp PCR với 25 cặp mồi gendystrophin trên mẫu ADN tế bào ối trực tiếp và nuôi cấy và ứng dụng chẩn đoán trước sinh cho một số thai phụ có nguy cơ c ao.  Đối tượng và phương pháp nghiê n cứu:20 mẫu tế bào ối trực tiếp và nuô i cấy của 20 thai phụ bình thường được thực hiện phản ứng PCR với 25 cặp mồi; 2 thai phụ nguy cơ cao được sàng lọc trước sinh: bước 1 xác định giới của thai bằng phương pháp PCR (gen TDF), bước 2 chẩn đoán trước sinh bệ nh DMD bằng phương pháp PCR.  Kết quả và kết luận:nồng độ ADN trung bình của tế bào ối nuôi cấy cao hơn hẳn trực tiếp, theo thứ tự là 103,8 ± 28,2 và 34,1 ± 13,6 (p < 0,001); 20 mẫu tế bào ối trực tiếp và nuôi cấy được thực hiện phản ứng PCR với 25
cặp mồi đều đọc rõ 23 exon và 2 vùng promoter (Pm, Pb). Chẩn đoán trước sinh 2 thai phụ có tiền sử sinh con bị bệ nh DMD: một thai nữ (gen TDF(-)), thai  phụ đã sinh một con gái bình thườ ng; một thainam (TDF(+)), không có mất đoạn được phát hiện so sánh với bệnh nhân DMD của gia đình mất đoạn từ exon 12?17, thai phụ đã sinh một con trai bình thường.

Loạn dưỡng cơ Duchenne (Duchenne Muscular dystrophy  (DMD))  là  bệnh  di  truyền  lặn  liên  kết nhiễm sắc thể X có tần số mắc cao nhất trong các bệnh cơ ở trẻ em. Những đột biến gen dystrophin là nguyên nhân gây ra bệnh [1]. Gen dystrophinnằm trên nhánh ngắn của nhiễm sắc thể X (Xp2.1) và là gen lớn nhất của người với chiều dài3000 Kb,  chứa  79  exon.  Gen này  phiên mã  ra mARN 14  Kb  và  tổng  hợp  protein  dystrophin  tham  gia vào cấu trúc và bảo vệ màng tế bào cơ [1].Những bệnh nhân bị đột biến gen dẫn tới không tổng hợp được  dystrophin  làm  cho  màng  tế  bào  cơ bị  huỷhoại khi co cơ, giải phóng creatine kinase (CK) vào máu  hậu  quả  là gây nên  các  triệu chứng  teo cơ, mất khả năng đi lại và chết trước tuổi trưởng thành vì tổn thương cơ tim và suy hô hấp [1]