CHẾ TẠO HẠT TỪ GẮN KHÁNG THỂ KHÁNG SALMONELLA SPP., DÙNG ĐỂ TĂNG KHẢ NĂNG PHÁT HIỆN VI KHUẨN
CHẾ TẠO HẠT TỪ GẮN KHÁNG THỂ KHÁNG SALMONELLA SPP., DÙNG ĐỂ TĂNG KHẢ NĂNG PHÁT HIỆN VI KHUẨN
Dương Ngọc Diễm*, Đỗ Thị Kim Yến*, Nguyễn Thị Nguyệt Thu*
TÓM TẮT :
Đặt vấn đề: Salmonella spp. là tác nhân hàng đầu gây ngộ độc thực phẩm. Phân tách miễn dịch từ (IMS) sử dụng các vi hạt từ tính, có bề mặt gắn kháng thể đặc hiệu với Salmonella để tóm bắt và cô đặc vi khuẩn trực tiếp trên các nền mẫu phức tạp, giúp giảm thiểu khả năng cho kết quả âm tính giả.
Mục tiêu nghiên cứu: Chế tạo phức hợp hạt từ gắn kháng thể kháng Salmonella và tối ưu phương pháp IMS trong việc bắt giữ và cô đặc vi khuẩn.
Phương pháp nghiên cứu: Tinh chế kháng thể kháng Salmonella từ kháng huyết thanh thương mại bằng phương pháp sắc kí ái lực miễn dịch. Kháng thể sau tinh chế được cộng hợp đồng trị lên hạt từ. Khảo sát các điều kiện tối ưu của phương pháp IMS trong tóm bắt và phát hiện Salmonella.
Kết quả nghiên cứu: Phương pháp IMS sử dụng 2 µl (9,8×109 hạt/ml) phức hợp hạt từ 1 µm gắn 200 µg kháng thể kháng Salmonella ủ với vi khuẩn trong 10 phút cho khả năng phát hiện 103 tế bào Salmonella/ml.
Kết luận: Kháng thể kháng Salmonella được tinh chế từ kháng huyết thanh thương mại và được gắn lên hạt từ đường kính 1 µm. Phức hợp hạt từ – kháng thể có khả năng bắt được tất cả các nhóm vi khuẩn Salmonella gây ngộ độc thực phẩm (B, D, E, C1, C2-C3) và nhóm A (chỉ được phân lập từ mẫu bệnh phẩm). Phương pháp IMS sử dụng phức hợp hạt từ-kháng thể tự chế tạo để tóm bắt và cô đặc hiệu quả Salmonella trực tiếp từ từ dung dịch đệm pha loãng.
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất