Đánh giá qui trình kỹ thuật sinh thiết biểu mô vùng rìa giác mạc dùng tạo tấm biểu mô giác mạc nuôi cấy

Đánh giá quy trình kỹ thuật sinh thiết mẫu mô vùng rìa giác mạc sử dụng cho việc nuôi cấy tạo tấm biểu mô giác mạc (GM). Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu tiến cứu, mô tả lâm sàng tiến hành trên thực nghiệm và trên bệnh nhân từ tháng 9 năm 2008 đến tháng 3 năm 2009. Mảnh mẫu biểu mô vùng rìa được lấy ở vị trí rìa phía trên, kích thước 3 x 5 mm, diện tích khoảng 15 mm². Nuôi cấy trong môi trường phát triển biểu mô có bổ sung hormon(Supplemental Hormonal Epithelial Medium  – SHEM), nhiệt độ 37oC tạo tấm biểu mô giác mạc với giá đỡ là màng ối người.  Kết quả: Tỷ lệ thành công tạo tấm biểu mô giác mạc trên thực nghiệm là 82% trong thời gian nuôi cấy là 2 tuần. Trên bệnh nhân, thời gian nuôi cấy tạo tấm biểumô khoảng 3 –  4 tuần tỷ lệ thành công là 67%. Các tấm biểu mô GM với 4  –  5 hàng tế bào và các tế bào biểu mô GM có hình dạng bình thường. Từ tấm biểu mô GM nuôi cấy trên thực nghiệm, bằng phương pháp hóa mô miễn dịch đã xác định được loại keratin đặc trưng của tế bào biểu mô GM (K3)  Kết luận:  Kỹ thuật sinh thiết mẫu biểu mô vùng rìa là một trong những bước quan trọng quyết định sự thành công của quá trình tạo tấm biểu mô GM nuôi cấy. Đặc biệt, trên bệnh nhân việc tiết kiệm tổ chức lành là việc cần cân nhắc  và tính ưu việt của việc sử dụng tấm biểu mô GM nuôi cấy là có thể nhắc lại phẫu thuật khi cần thiết

Sự  hiểu  biết  về  tế  bào  nguồn  biểu  mô  giác mạc  (GM)  và  sự  phát  triển  của  công  nghệ  nuôi cấy tế bào đã mở ra hướng mới trong điều trị hội chứng suy giảm tế bào nguồn biểu mô GM [1 – 8]. Chức  năng  của  các  tế  bào  nguồn  ở  vùng  rìa  đã được nhiều nhà nhãn khoa nghiên cứu và kết luận có 3 chức năng cơ bản: (1) Là nguồn bù đắp về mặt  số  lượng  tế  bào  biểu  mô  GM  (2)  Biệt  hóa thành tế bào biểu mô GM (3) Ngăn chặn không cho  biểu  mô  kết  mạc  xâm  lấn  lên  bề  mặt  GM [9  –  12]. Các tác giả đã xác định tế bào nguồn của biểu mô GM nằm ở lớp đáy trong những ổ vi môi trường của biểu mô vùng rìa giác mạc. Do đó, để tiến hành nuôi cấy tạo tấm biểu mô GM thành công thì kỹ thuật sinh thiết mẫu biểu mô vùng rìa có vai trò quan trọng hàng đầu [1]