GIÁM ĐỊNH SÁN LÁ RUỘT NHỎ HAPLORCHIS TAI CHUI VÀ H. PUMILIO SỬ DỤNG
GIÁM ĐỊNH SÁN LÁ RUỘT NHỎ HAPLORCHIS TAI CHUI VÀ H. PUMILIO SỬ DỤNG CHỈ THỊ ITS-2 (INTERNAL TRANSCRIBED SPACER)
Kim Văn Vạn
TÓM TẮT
Sán lá ruột nhỏ Haplorchis thường ký sinh ở ruột non của người và động vật ăn cá nhiễm ấu trùng sán chưa được xử lý triệt để. Do trứng, ấu trùng và sán trưởng thành có kích thước nhỏ, hình dạng giống với một số loài sán lá khác nên dễ chẩn đoán và nhận dạng nhầm.
Mục tiêu: Giám định phân tử 2 loài sán lá ruột nhỏ H. taichui và H. pumilio.
Phương pháp: Một phương pháp sinh học phân tử lần đầu tiên được áp dụng ở Việt Nam nhằm xác định sán lá ruột nhỏ bao gồm H. taichui và H. pumilio dựa trên phản ứng PCR gen ITS-2 với mồi xuôi là 3SF: 5’-GGTACCGGTGGATCACTCGGCTCGTG-3’ và mồi ngược BD2R: 5′-TATGCTTAAATTCAGCGGGT-3′), sử dụng chung cho các loài sán lá ở nhiệt độ bám mồi là 50oC, và giải trình trình tự phân tích gen. Nguồn mẫu được dùng cho nghiên cứu gồm sán trưởng thành ký sinh trên người và ấu trùng metacercaria ký sinh trên cá được thu ở Nam Định (Việt Nam) và Băng cốc (Thái Lan).
Kết quả và kết luận: Chuỗi gen ITS-2 thu được có độ dài 290 bp là của H. pumilio và 446 bp là của H. taichui. Trình tự sắp xếp nucleotide trong gen ITS-2 của H. taichui chênh lệch so với H. pumilio do một đoạn gen có độ dài 154 nucleotide được chèn vào từ nucleotide thứ 198 đến 352. Có sự tương đồng cao (99-100%) trong gen ITS-2 giữa mẫu sán Việt Nam và mẫu sán Thái Lan trong nghiên cứu
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất