Hiệu quả của linh hoàng thang đối với MMP-9 và MRAN MMP-9 trên mô hình chuột xuất huyết não

Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) là các chất liên quan đến việc tái tưới máu tổn thương và phù não sau xuất huyết não. Mục tiêu của nghiên cứu nhằm đánh giá sự thay đổi hoạt tính và biểu đạt mRNA của MMP-9 trên chuột cống bị bệnh xuất huyết não (ICH) được điều trị bằng Linh hoàng thang. 60 con chuột cống trắng chuẩn SD, tạo mô hình ICH, ngẫu nhiên chia 4 nhóm: Giả thủ thuật, Mô hình, Linh hoàng thang và Não huyết khang. Lần lượt sau 1,3,7 ngày điều trị lấy não chuột, sử dụng phương pháp miễn dịch huỳnh quang đo hoạt tính của MMP-9 trong não chuột; sau ngày thứ 3 lấy não chuột dùng kỹ thuật RT- PCR đo tỷ lệ mRNA của MMP-9 trong não chuột. Qua đó ta có kết luận. Linh hoàng thang có tác dụng hạn chế lượng MMP-9 biểu đạt, qua đó giảm thiểu độc tính với tế bào thần kinh và giảm phù não.

Xuất huyết não (Intracerebral hemorrhage – ICH) là một bệnh thường gặp trong bệnh lý mạch máu não, biểu hiện tổn thương là phù não và tăng áp lực nội sọ. Trong những năm gần đây, các nghiên cứu đã chỉ ra rằng MMP-9 có liên quan đến các tổn thương nhồi máu não và xuất huyết não cũng như liên quan đến tổn thương hàng rào máu não và phù não.. Chính vì vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài này với mục tiêu:
Đánh giá sự thay đổi hoạt tính của MMP- 9 và biểu đạt mRNA của MMP-9 trên chuột cống trắng xuất huyết não điều trị bằng Linh hoàng thang.
II.    ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
1.    Chấtliệunghiêncứu
Bài thuốc Linh hoàng thang là từ bài thuốc Linh giác câu đằng thang gia giảm, thành phần gồm: Linh dương giác, Câu đằng, Cúc hoa, Bối mẫu, Sinh đại hoàng do Khoa dược của bệnh viện Hữu nghị Trung Nhật, Bắc Kinh- Trung Quốc chế dưới dạng dịch cao, khi dùng pha với nước cất.
Thuốc đối chứng là Não huyết khang do công ty TNHH Wanxi, Hà Nam-Trung Quốc cung cấp.
2.    Đối tượng nghiên cứu
60 con chuột, ngẫu nhiên chia làm 4 nhóm: nhóm giả thủ thuật, nhóm mô hình, nhóm Linh hoàng thang và nhóm Não huyết khang, mỗi nhóm 15 con.
Nghiên cứu được tiến hành tại phòng thí nghiệm của khoa Dược lý lâm sàng, Đại học Trung Y Dược Bắc Kinh, Trung Quốc.
3. Phương pháp nghiên cứu
Mô hình xuất huyết não được tạo bằng cách tiêm 0,5 UI/ 2 ụl collagenase VII vào nhân đuôi bên phải của não chuột theo phương pháp của Rogenberg [3]. Nhóm giả thủ thuật thao tác tương tự nhưng tiêm 0,2 ụl nước muối sinh lý vào nhân đuôi. Nhóm giả thủ thuật và nhóm mô hình cho uống nước muối sinh lý hàng ngày, nhóm Linh hoàng thang cho uống Linh hoàng thang (liều 1,8 g/ kg cân nặng), nhóm Não huyết khang được cho uống Não huyết khang với liều điều trị. Sau quá trình điều trị 1, 3, 7 ngày, lấy não chuột, sử dụng phương pháp miễn dịch huỳnh quang đo hoạt tính của MMP-9 trong não chuột. Sau ngày điều trị thứ 3 lấy não chuột dùng kỹ thuật RT – PCR đo tỷ lệ mRNA của MMP-9 trong não chuột.
3.    Xử lý số liệu: theo chương trình xử lý thống kê phần mềm SPSS 13.0