Hoàn chỉnh hệ thống pcr đa mồi để chẩn đoán và theo dõl Vi Khuẩn thưong hàn đa kháng thuốc

Hoàn chỉnh hệ thống pcr đa mồi để chẩn đoán và theo dõl Vi Khuẩn thưong hàn đa kháng thuốc

1. Đóng góp mới của đề tài
– Áp dụng kỹ thuật sinh học phân tử vào chẩn đoán căn nguyên gây bênh thương hàn. Kỹ thuật này có ưu điểm là đô nhạy và đặc hiệu cao, thời gian xét nghiệm ngắn hơn so với các kỹ thuật khác, có khả năng phát hiện được 4 loài vi khuẩn thương hàn trong môt lần xét nghiệm; lượng bệnh phẩm cần ít (chỉ bằng 1/10 so với cấy máu). Vì vậy, bệnh được chẩn đoán sớm hơn trước.
– Phát hiện khả năng đa kháng thuốc của vi khuẩn thương hàn cùng môt lức với chẩn đoán căn nguyên. Điều này phục vụ cho điều trị đứng sớm hơn, không cần thời gian chờ đợi làm kháng sinh đồ.
– Tiên lượng bệnh tốt hơn do biết sớm được đa đề kháng hay không và theo dõi được hiện diện của vi khuẩn trong máu sẽ điều chỉnh được kháng sinh đang sử dụng.
– Đưa kỹ thuật giải trình tự gen, áp dụng lần đầu tiên, vào trường ĐHY Hà Nôi; góp phần nâng cao chất lượng đào tạo và nghiên cứu khoa học của Trường.
– Góp phần đào tạo sinh viên với việc đưa sinh viên tiếp cận các kỹ thuật cao, mới trên thế’ giới.
2. Áp dụng vào thực tiễn
– Chẩn đoán sớm bệnh thương hàn hoặc phát hiện vi khuẩn thương hàn ngoài môi trường (nước, thực phẩm).
– Phát hiện sớm khả năng đa đề kháng của vi khuẩn thương hàn.
3. Đánh giá thực hiện đề tài đối chiếu với đề cương đã được phê duyệt
– Đề tài đã hoàn thành tốt tất cả các nôi dung đã được phê duyệt trong đề cương: đưa được ra quy trình thực hiện phản ứng PCR đa mồi, có 2 tính năng tốt: 1) phát hiện được 4 loài vi khuẩn thương hàn thường gặp ở nước ta và 2) phát hiện được khả năng đa đề kháng của căn nguyên gây bệnh.
– Đã đào tạo 1 sinh viên đại học và 2 cao học.
4. ý kiến đề xuất
– Phổ biến rông rãi kết quả nghiên cứu để áp dụng cho người bệnh, kiểm soát vệ sinh an toàn thực phẩm, giám sát chất lượng nước ngoài môi trường; giám sát đa kháng thuốc kháng sinh.
ĐẶT VẤN ĐỂ
Theo thông báo của Tổ chức Y tế thế giới, bênh thương hàn (typhoid fever) và phó thương hàn (paratyphoid fever) vẫn đang là vấn đề sức khoẻ quan trọng ở nhiều nước trên thế’ giới, đặc biệt là các nước đang phát triển. Khu vực Đông-Nam châu Á và châu Phi là những vùng có dịch thương hàn lưu hành và là một trong những vấn đề y tế’ nan giải hiện nay.
Vấn đề thương hàn càng trở nên trầm trọng hơn do hiện nay đã xuất hiện và lan tràn rất nhanh các chủng vi khuẩn thương hàn đa đề kháng, làm cho điều trị khó khăn hơn nhiều và những biến chứng trầm trọng hơn (thủng ruột) có thể xuất hiện do chẩn đoán chậm và điều trị đặc hiệu không kịp thời.
Các phương pháp thông thường chẩn đoán bệnh thương hàn đòi hỏi 4-6 ngày trong trường hợp dương tính và 7 ngày trong trường hợp xác định âm tính. Vì vậy, đã không đáp ứng được yêu cầu cấp bách của điều trị thương hàn.
Hiện nay, đã có một số công trình nghiên cứu dùng kỹ thuật PCR bổ sung cho các kỹ thuật chẩn đoán kinh điển. Kỹ thuật này cho kết quả nhanh hơn và độ nhạy cũng cao hơn rất nhiều. Tuy vậy, các công trình này đều chỉ tập trung vào phát hiện S. typhi hoặc S. paratyphi A bằng các phản ứng riêng lẻ và không phát hiện được khả năng đa đề kháng của chúng. Điều đó gây tốn kém và không đáp ứng được nhu cầu của điều trị.
Việc tăng “phổ” phát hiện của PCR đối với các Salmonella khác (S. paratyphi B và S. paratyphi C chẳng hạn) và phát hiện sơ bộ khả năng đa đề kháng của chúng là cần thiết cho việc điều trị có hiệu quả cao hơn hiện nay.
Chính vì vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài “Hoàn chỉnh hệ thống PCR đa mồi để chẩn đoán và theo dổi vi khuẩn thương hàn đa kháng thuốc ” nhằm 02 mục tiêu:
1. Phát triển hệ thống PCR mới, đa mồi để phát hiện các Salmonella gây bệnh thương hàn thường gặp ở nước ta.
2. Bước đầu đánh giá độ nhạy, đặc hiệu và phản ứng chéo của PCR nói trên trong chẩn đoán bệnh thương hàn và theo dõi sự hiện diện của vi khuẩn thương hàn đa kháng thuốc trong máu.