Hoàn chỉnh hệ thống pcr đa mồi trong chẩn đoán và theo dõi vi khuẩn thương hàn đa kháng thuốc

Các phương pháp thông thường chẩ n đoán bệnh thương hàn đòi hỏi 4-6 ngày trong trường
hợp dương tính và 7 ngà y trong trường hợp xác định âm tính. Vì vậy, đã không đáp ứng được yêu cầu cấp bách của điều trị thương hàn. Hiện nay, đã có một số công trình nghiên cứu dùng kỹ thuật PCR bổ sung cho các kỹ thuật chẩn đoán kinh điển. Kỹ thuậ t này cho kế t quả nhanh hơn và độ nhạy cũng cao hơn rấ t nhiều. Tuy vậ y, các công trình này đều chỉ tập trung vào phát hiện S. typhi hoặc S. paratyphi A bằng các phản ứng riêng lẻ và không phát hiện được khả năng đa đề kháng của chúng. Điều đó gây tốn kém và không đáp ứng được nhu cầu của điều trị.Chẩn đoán sớm bệnh thương hàn và phát hiện đa đề kháng của Salmonella có ý nghĩa lớn trong điều
trị đặc hiệu kịp thời, hiệu quả cao. Mục tiêu: Phát triển PCR đa mồi và nghiên cứu các điều kiện tối ưu; Đối tượng và phương pháp:Giải trình tự gen kháng nguyên lông (H), thiết kế mồi, chạy PCR với các chủng Salmonella mẫu; thay đổi điều kiện phản ứng, chọn điều kiện tối ưu. Thử thách PCR đã được tối ưu với máu bệnh nhân thương hàn và không thương hàn.Kết quả: Điều kiện tối ưu cho PCR là: nhiệt độ gắn mồi 54,1
o
C – 59,5
o
C; nhiệt độ kéo dài mồi 71,4
o
C – 73,6
o
C; nồng độ MgCl21,5 – 2,5 mM. Sau 4 ngày điều trị đặc hiệu, không còn thấy vi khuẩn thương hàn trong máu bệnh nhân. Độ nhạy và đặc hiệu của PCR này là 100%, phản ứng chéo 0%. Kết luận:PCR đa mồi có khả năng chẩn đoán sớm bệnh thương hàn và phát hiện đa đề kháng của Salmonella với độ nhạy và đặc hiệu cao.