Hoàn thiện kỹ thuật tách chiết adn của shigella và eiec trực tiếp từ phân

Hoàn thiện kỹ thuật tách chiết adn của shigella và eiec trực tiếp từ phân

Phương pháp tách chiết ADN trực tiếp từ phânđơn giản, nhanh, hiệu quả và ít tốn kém có ý nghĩa quan trọng trong chẩn đoán nhanh căn nguyên vi khuẩn gây tiêu chảy từ phân.  Mục tiêu:phát triển kỹ thuật tách chiết ADN của Shigella spp và EIEC trực tiếp từ phân. Đối tượng, vật liệu, phương pháp nghiên cứu:Chủ ng EIEC ATCC 43893, E. coli ATCC 11775 được dùng làm chứng dương và âm. ADN sau khi tách chiết được sử dụng cho phản ứng PCR.  Kết quả:Quy trình tách chiết ADN trực tiếp từ phân đã được phát triển và hoàn thiện với các ưu điểm: đơn giản, nhanh, rẻ tiền, dễ áp dụng. Kết luận:kỹ thuật tách chiết ADN của Shigella và EIEC trực tiếp từ phân đã được phát triển thành công. Kết quả của nghiên cứu đã đo ng góp vào việc chẩn đoán sớm và hiệu quả bệnh tiêu chảy.

Kỹ thuật PCR phối hợp với nuôi cấy phân lập thường được  dùng  để  phát hiện  các  vi  khuẩn  có khả  năng  gây  tiêu  chảy  từ  các  bệnh  phẩm  lâm sàng và cho kết quả với độ nhạy và độ đặchiệu cao [1, 2]. Tuy nhiên, qui trình này cần ít nhất 24 giờ cho vi khuẩn mọc sau khi cấy bệnh phẩm trên môi trường đặc. Do vậy, trong hầu hết các trường hợp tiêu chảy, việc xác định căn nguyên và quyết định  phương  hướng  điều  trị  gặp  rất  nhiều  khó khăn. Thêm vào đó, nhiều trường hợp, bệnh tiến triển rất nhanh trên lâm sàng khiến việc xác định sớm căn nguyên gây tiêu chảy có ý nghĩa rất quan trọng. Vì vậy, việc phát triển qui trình PCR nhằm xác định sớm các căn nguyên vi khuẩn trực tiếp từ bệnh phẩm phân là vấn đề cấp thiết. Tách chiết và tinh sạch ADN trực tiếp từ bệnh phẩm là chìa khoá đối kỹ thuật PCR trong xác định trực tiếp các chủng  vi  khuẩn  từ  bệnh  phẩm.  Đã  có  một  số phương  pháp  tách  chiết  và  tinh  sạch  ADN  trực tiếp  từ  phân  như  phương  pháp  tách  chiết  dùng ethanol; phương pháp sắc ký lỏng cao áp; phương pháp dùng bi thuỷ tinh (hoặc bi silic) và dungdịch  chaotropic…  Tuy  nhiên,  các  phương  pháp  này  hoặc  là  quá  phức  tạp,  hoặc  quá  đắt  và  chỉ  thực hiện được ở những phòng xét nghiệm được trang bị máy móc hiện đại. Do vậy, một phương pháp tách chiết ADN trực tiếp từ phân đơn giản, nhanh, hiệu quả và ít tốn kém có ý nghĩa quan trọng trong hoàn cảnh ở Việt Nam. Vì lý do trên, nghiên cứu
này được tiến hành với mục tiêu:
Hoàn  thiện  kỹ  thuật  tách  chiết  ADN  của  vi
khuẩn trực tiếp từ phân

Thông tin này hy vọng sẽ gợi mở cho các bạn hướng tìm kiếm và nghiên cứu hữu ích

Leave a Comment