Hoàn thiện kỹ thuật tách chiết adn của shigella và eiec trực tiếp từ phân
Phương pháp tách chiết ADN trực tiếp từ phânđơn giản, nhanh, hiệu quả và ít tốn kém có ý nghĩa quan trọng trong chẩn đoán nhanh căn nguyên vi khuẩn gây tiêu chảy từ phân. Mục tiêu:phát triển kỹ thuật tách chiết ADN của Shigella spp và EIEC trực tiếp từ phân. Đối tượng, vật liệu, phương pháp nghiên cứu:Chủ ng EIEC ATCC 43893, E. coli ATCC 11775 được dùng làm chứng dương và âm. ADN sau khi tách chiết được sử dụng cho phản ứng PCR. Kết quả:Quy trình tách chiết ADN trực tiếp từ phân đã được phát triển và hoàn thiện với các ưu điểm: đơn giản, nhanh, rẻ tiền, dễ áp dụng. Kết luận:kỹ thuật tách chiết ADN của Shigella và EIEC trực tiếp từ phân đã được phát triển thành công. Kết quả của nghiên cứu đã đo ng góp vào việc chẩn đoán sớm và hiệu quả bệnh tiêu chảy.
Kỹ thuật PCR phối hợp với nuôi cấy phân lập thường được dùng để phát hiện các vi khuẩn có khả năng gây tiêu chảy từ các bệnh phẩm lâm sàng và cho kết quả với độ nhạy và độ đặchiệu cao [1, 2]. Tuy nhiên, qui trình này cần ít nhất 24 giờ cho vi khuẩn mọc sau khi cấy bệnh phẩm trên môi trường đặc. Do vậy, trong hầu hết các trường hợp tiêu chảy, việc xác định căn nguyên và quyết định phương hướng điều trị gặp rất nhiều khó khăn. Thêm vào đó, nhiều trường hợp, bệnh tiến triển rất nhanh trên lâm sàng khiến việc xác định sớm căn nguyên gây tiêu chảy có ý nghĩa rất quan trọng. Vì vậy, việc phát triển qui trình PCR nhằm xác định sớm các căn nguyên vi khuẩn trực tiếp từ bệnh phẩm phân là vấn đề cấp thiết. Tách chiết và tinh sạch ADN trực tiếp từ bệnh phẩm là chìa khoá đối kỹ thuật PCR trong xác định trực tiếp các chủng vi khuẩn từ bệnh phẩm. Đã có một số phương pháp tách chiết và tinh sạch ADN trực tiếp từ phân như phương pháp tách chiết dùng ethanol; phương pháp sắc ký lỏng cao áp; phương pháp dùng bi thuỷ tinh (hoặc bi silic) và dungdịch chaotropic… Tuy nhiên, các phương pháp này hoặc là quá phức tạp, hoặc quá đắt và chỉ thực hiện được ở những phòng xét nghiệm được trang bị máy móc hiện đại. Do vậy, một phương pháp tách chiết ADN trực tiếp từ phân đơn giản, nhanh, hiệu quả và ít tốn kém có ý nghĩa quan trọng trong hoàn cảnh ở Việt Nam. Vì lý do trên, nghiên cứu
này được tiến hành với mục tiêu:
Hoàn thiện kỹ thuật tách chiết ADN của vi
khuẩn trực tiếp từ phân
Thông tin này hy vọng sẽ gợi mở cho các bạn hướng tìm kiếm và nghiên cứu hữu ích