Hoàn thiện kỹ thuật tách chiết ADN của SHIGELLA và EIEC trực tiếp từ phân

Phương pháp tách chiết ADN trực tiếp tù’ phạn đơn gian, nhạnh, hiệu quạ vạ ít ton kém cộ y nghĩạ quan trong trong chẩn đoạn nhạnh cạn nguyện vi khuẩn gậy tiéu chạy tù’ phạn. Mục tiêu: phát triện ky thuật tách chiết ADN cuạ Shigéllạ spp vạ EIEC trực tiếp tù’ phạn. Đối tượng, vật liêu, phương pháp nghiên cứu: Chung EIEC ATCC 43893, E. coli ATCC 11775 được dung lạm chứng dương vạ âm. ADN sạu khi tách chiết được sù dung cho phản ùng PCR. Kết quả: Quy trình tách chiết ADN trực tiếp tù’ phạn đá được phát triện vạ hoạn thiện với cạc ưu điểm: đơn gián, nhạnh, ré tién, dé áp dung. Kết luận: ky thuát tách chiết ADN cuạ Shigéllạ vạ EIEC trực tiếp tù’ phán đá được phát triến thánh cong. Kết quá cuạ nghién cùu đá đong gop vào viéc chány.đoán sơm vá hiéu quá bénh tiéu cháy.Ky thuật PCR phôi hợp với nuôi cay phân lập thường được dung để phât hiên câc vi khuân cô khâ nâng gậy tiểu chây tư câc bênh phâm lâm sang vâ chô kết quâ vời đô nhây vâ đô đâc hiểu câô [1, 2]. Tuy nhiển, qui trình nây cân ít nhât 24 giờ chô vi khuẩn môc sâu khi cây bênh phẩm trển môi trường đâc. Dô vây, trông hâu hết câc trường hợp tiểu chây, việc xâc định cân nguyển vâ quyểt định phường hường điểu trị gâp rât nhiều khô khân.

Thểm vâô đô, nhiểu trường hờp, bênh tiến triển rât nhânh trển lâm sâng khiển viêc xâc định sờm cân nguyên gây tiểu chây cô y nghĩâ rât quân trông. Vì vây, viểc phât triển qui trình PCR nhâm xâc định sờm câc cân nguyên vi khuân trực tiểp tư bênh phâm phân lâ vân đê câp thiết. Tâch chiết vâ tinh sạch ADN trưc tiếp tư bênh phâm lâ chìâ khôâ đôi ky thuât PCR trông xâc định trưc tiếp câc chung vi khuân tư bênh phâm. Đâ cô môt sô’ phường phâp tâch chiểt vâ tinh sâch ADN trưc tiểp tư phân như phường phâp tâch chiết dung êthânôl; phường phâp sâc ky lông câô âp; phường phâp dung bi thuy tinh (hôâc bi silic) vâ dung dịch châôtrôpic… Tuy nhiên, câc phường phâp nây hôâc lâ quâ phưc tâp, hôâc quâ đât vâ chỉ thưc hiên đườc ờ nhưng phông xêt nghiêm đườc trâng bị mây môc hiên đâi. Dô vây, môt phường phâp tâch chiết ADN trưc tiếp tư phân đờn giân, nhânh, hiểu quâ vâ ít tôn kêm cô y nghĩâ quân trông trông hôân cânh ờ Viết Nâm. Vì ly dô trên, nghiên cưu nây đườc tiến hânh vời mục tieu:
Hoán thiên ky thuật tách chiết ADN cua vi khuẩn trực tiếp tứ’phán.