Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Giải phẫu bệnh- Tế bào học
Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Giải phẫu bệnh- Tế bào học
Chủ biên :PGS TS Nguyễn Thị Xuyên
Nhà xuất bản y học năm 2013
Xét nghiệm mô bệnh học và tế bào bệnh học là nền tảng vô cùng quan trọng trong chẩn đoán, đƣợc đánh giá là tiêu chuẩn vàng để xác định bệnh. Nó không chỉ là chẩn đoán mô bệnh học hoặc tế bào bệnh học đơn thuần, mà còn có vai trò quyết định cho các chỉ định lâm sàng, đồng thời cung cấp các dữ liệu tiên lƣợng quan trọng, giúp cho việc lựa chọn phƣơng pháp điều trị nội khoa hoặc ngoại khoa một cách xác đáng nhất. Không những thế, các dữ liệu mà mẫu xét nghiệm tế bào bệnh học và mô bệnh học cung cấp còn đƣợc sử dụng để đánh giá hiệu quả của việc điều trị hiện hành hoặc các thử nghiệm điều trị mới , cũng nhƣ cung cấp các thông tin giúp theo dõi/giám sát diễn biến bệnh tật trong các chƣơng trình sàng lọc tại cộng đồng.
Chỉ riêng lĩnh vực ung thƣ, trong thời gian tới, phƣơng pháp điều trị đích (điều trị ung thƣ theo cá thể) sẽ ngày càng phát triển và chuyên ngành giải phẫu bệnh – tế bào bệnh học với xét nghiệm mô bệnh học, hóa mô miễn dịch và đặc biệt là kỹ thuật lai tại chỗ sẽ là những công cụ hữu ích nhất cho nhà lâm sàng ung thƣ trong việc chẩn đoán, điều trị và tiên lƣợng bệnh
MỤC LỤC
YÊU CẦU CHUNG CỦA XÉT NGHIỆM MÔ BỆNH HỌC VÀ TẾ BÀO HỌC
I. C¸c quy tr×nh kü thuËt phÉu tÝch bÖnh phÈm ……………… 1
1. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM ĐỂ CẤY VI TRÙNG, NẤM, VIRUT TRÊN MÔ ………………………….. 5
2. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM LẤY MẪU PHÂN TÍCH DNA VÀ SỰ TĂNG SINH TẾ BÀO BẰNG
PHƢƠNG PHÁP ĐO TẾ BÀO DÕNG CHẢY…………………………………………………………………… 8
3. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM ĐỂ XÉT NGHIỆM HIỂN VI ĐIỆN TỬ ……………………………………… 11
4. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM ĐỂ XÉT NGHIỆM THỤ THỂ HORMON ………………………………….. 14
5. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TỪ SINH THIẾT LÕI KIM ………………………………………………………. 17
6. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CÁC TỔN THƢƠNG LÀNH TÍNH CỦA DA ……………………………. 20
7. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CÁC TỔN THƢƠNG ÁC TÍNH HOẶC NGHI ÁC TÍNH CỦA DA 23
8. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CÁC TỔN THƢƠNG DA (SINH THIẾT BẰNG KÌM BẤM) ………. 26
9. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CÁC TỔN THƢƠNG DA (SINH THIẾT BẰNG DAO ) ……………… 29
10. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TỔN THƢƠNG MÔI (BỆNH PHẨM HÌNH CHỮ V) ……………….. 32
11. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM KẾT MẠC MẮT ……………………………………………………………………. 34
12. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM MÖC MẮT ……………………………………………………………………………. 36
13. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM THANH QUẢN …………………………………………………………………….. 41
14. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM PHỔI ……………………………………………………………………………………. 44
15. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TUYẾN ỨC ………………………………………………………………………….. 47
16. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TUYẾN GIÁP ……………………………………………………………………….. 49
17. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TUYẾN CẬN GIÁP ………………………………………………………………. 52
18. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM U TUYẾN NƢỚC BỌT ………………………………………………………….. 55
19. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM THỰC QUẢN ……………………………………………………………………….. 57
20. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM PHẪU THUẬT U DẠ DÀY …………………………………………………… 60
21. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM PHẪU THUẬT LOÉT DẠ DÀY ……………………………………………. 63
22. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM RUỘT NON ………………………………………………………………………….. 66
23. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM U ĐẠI TRÀNG ……………………………………………………………………… 69
24. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM POLIP ĐẠI TRÀNG ………………………………………………………………. 72
25. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM RUỘT THỪA ……………………………………………………………………….. 75
26. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM U GAN …………………………………………………………………………………. 78
27. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TÖI MẬT ……………………………………………………………………………… 81
28. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM ÂM HỘ ………………………………………………………………………………… 84
29. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM SINH THIẾT CỔ TỬ CUNG ………………………………………………….. 86
30. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CẮT CHÓP CỔ TỬ CUNG …………………………………………………….. 88
31. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM NẠO HOẶC SINH THIẾT NỘI MẠC TỬ CUNG …………………….. 91
32. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CẮT BỎ TỬ CUNG ………………………………………………………………. 93
33. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CẮT BỎ TỬ CUNG DO UNG THƢ ……………………………………….. 96
34. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CẮT BỎ TỬ CUNG DO QUÁ SẢN HOẶC UNG THƢ NỘI MẠC
TỬ CUNG …………………………………………………………………………………………………………………….99
35. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TỤY …………………………………………………………………………………….102
36. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TUYẾN THƢỢNG THẬN ……………………………………………………..107
37. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM U THẬN ………………………………………………………………………………109
38. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM BÀNG QUANG…………………………………………………………………….111
39. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CẮT BỎ DƢƠNG VẬT …………………………………………………………115
40. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TINH HOÀN ………………………………………………………………………..117
41. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CẮT BỎ TOÀN BỘ TUYẾN TIỀN LIỆT ………………………………..120
42. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TUYẾN TIỀN LIỆT (CẮT BỎ BẰNG ĐƢỜNG MỔ TRÊN
XƢƠNG VỆ) ……………………………………………………………………………………………………………….123
43. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TUYẾN TIỀN LIỆT (CẮT BỎ BẰNG ĐƢỜNG NIỆU ĐẠO) ……125
44. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM BÁNH RAU (ĐƠN THAI) ……………………………………………………..128
45. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM BÁNH RAU (SONG THAI)……………………………………………………131
46. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM SẢY THAI ……………………………………………………………………………134
47. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM BUỒNG TRỨNG ………………………………………………………………….137
48. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM VÕI TỬ CUNG …………………………………………………………………….139
49. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM VÖ (SINH THIẾT VÀ/HOẶC CẮT BỎ RỘNG ĐỐI VỚI CÁC U
SỜ ĐƢỢC) ………………………………………………………………………………………………………………….142
50. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM VÖ (TOÀN BỘ) ……………………………………………………………………145
51. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM SINH THIẾT HẠCH ……………………………………………………………..151
52. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM HẠCH NẠO VÉT ………………………………………………………………….153
53. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM NẠO VÉT TRIỆT ĐỂ HẠCH CỔ …………………………………………..155
54. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM U MÔ MỀM …………………………………………………………………………158
55. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM DÂY KINH NGOẠI VI ………………………………………………………….161
56. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM LÁCH ………………………………………………………………………………….163
57. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM XƢƠNG (SINH THIẾT) ………………………………………………………..166
58. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM XƢƠNG – CẮT ĐẦU XƢƠNG ĐÙI ……………………………………….168
59. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM U XƢƠNG ……………………………………………………………………………171
60. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CHỌC HÖT TỦY XƢƠNG ……………………………………………………174
61. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TỦY XƢƠNG (TỪ CẮT XƢƠNG SƢỜN) ………………………………176
62. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM TỦY XƢƠNG (SINH THIẾT LÕI KIM) ………………………………….178
63. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM CHI DƢỚI DO TẮC NGHẼN MẠCH MÁU (cắt cụt chi) ……………180
64. PHẪU TÍCH CẮT BỎ XƢƠNG THÁI DƢƠNG – TAI ………………………………………………………185
65. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM SINH THIẾT CƠ VÂN ………………………………………………………….188
66. PHẪU TÍCH BỆNH PHẨM THAY VAN TIM ………………………………………………………………….190
II. C¸c quy tr×nh kü thuËt cè ®Þnh, chuyÓn ®óc, c¾t
m¶nh BỆNH PHẨM ………….. Error! Bookmark not defined.
67. CỐ ĐỊNH BỆNH PHẨM BẰNG FORMOL ĐỆM TRUNG TÍNH ……………………………………….193
68. CỐ ĐỊNH BỆNH PHẨM BẰNG DUNG DỊCH BOUIN ……………………………………………………. 196
69. CỐ ĐỊNH BỆNH PHẨM BẰNG DUNG DỊCH GENDRE ………………………………………………… 198
70. CỐ ĐỊNH BỆNH PHẨM BẰNG DUNG DỊCH ELFTMAN ………………………………………………. 200
71. KHỬ CANXI CÁC BỆNH PHẨM XƢƠNG ……………………………………………………………………. 202
72. KỸ THUẬT CHUYỂN BỆNH PHẨM BẰNG TAY …………………………………………………………. 205
73. KỸ THUẬT CHUYỂN BỆNH PHẨM BẰNG MÁY ………………………………………………………… 207
74. KỸ THUẬT VÙI PARAFIN …………………………………………………………………………………………… 209
75. KỸ THUẬT ĐÖC KHỐI PARAFIN ……………………………………………………………………………….. 211
76. KỸ THUẬT CẮT MẢNH BỆNH PHẨM CHUYỂN ĐÖC TRONG PARAFIN ………………….. 213
77. KỸ THUẬT CẮT LẠNH MẢNH MÔ …………………………………………………………………………….. 215
III. C¸c quy tr×nh kü thuËt nhuém m¶nh c¾t m« trong
paraffin …………………………………………………………………………. 218
78. NHUỘM HEMATOXYLIN- EOSIN (HE) CÁC MẢNH CẮT MÔ …………………………………….. 218
79. NHUỘM PERIODIC AXIT SCHIFF (PAS) ……………………………………………………………………… 221
80. NHUỘM XANH ALCIAN (theo Mowry,1960) ………………………………………………………………… 224
82. NHUỘM GIEMSA TRÊN MẢNH CẮT MÔ PHÁT HIỆN HELICOBACTER PYLORI ………. 229
83. NHUỘM VAN GIESON ………………………………………………………………………………………………… 232
84. NHUỘM BA MÀU CỦA MASSON (1929) …………………………………………………………………….. 236
85. NHUỘM ĐA SẮC THEO LILLIE (1951) ………………………………………………………………………… 239
86. NHUỘM CUSTER CHO CÁC MẢNH CẮT TỦY XƢƠNG ……………………………………………… 242
87. NHUỘM SCHMORL CHO CÁC MẢNH CẮT XƢƠNG ………………………………………………….. 245
88. NHUỘM XANH PHỔ PERL PHÁT HIỆN ION SẮT ……………………………………………………….. 248
89. NHUỘM GROCOTT …………………………………………………………………………………………………….. 251
90. NHUỘM BẠC WARTHIN – STARRY PHÁT HIỆN HELICOBACTER PYLORI ………………. 255
91. NHUỘM ĐỎ CONGO KIỀM (theo Puchtler 1962) …………………………………………………………… 258
92. NHUỘM HYDROXIT SẮT (THEO HALE ) ……………………………………………………………………. 261
93. NHUỘM DIAMIN SẮT CAO (HIGH IRON DIAMINE) …………………………………………………… 264
94. NHUỘM SỢI VÕNG THEO GOMORI …………………………………………………………………………… 267
95. NHUỘM ANDEHIT FUCSIN (ALDEHYDE FUCHSIN) CHO SỢI CHUN ………………………… 270
96. NHUỘM ORCEIN CẢI BIÊN THEO SHIKATA PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN HBsAg …. 273
97. NHUỘM ORCEIN PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN HBsAg TRONG MÔ GAN ………………. 276
IV. C¸c quy tr×nh kü thuËt nhuém ph¶i dïng m¶nh c¾t
l¹nh ………………………………………………………………………………… 279
98. NHUỘM SOUDAN III HOẶC IV TRONG DUNG DỊCH ETANOL ………………………………….. 279
99. NHUỘM DẦU ĐỎ O …………………………………………………………………………………………………….. 282
100. NHUỘM ĐEN SOUDAN B TRONG DIACETIN …………………………………………………………… 285
101. NHUỘM ĐEN SOUDAN B HÕA TAN TRONG PROPYLEN- GLYCOL ………………………….288
102. NHUỘM ĐEN SOUDAN B HÕA TAN TRONG ETANOL – GLYCOL …………………………….291
103. NHUỘM LIPID TRUNG TÍNH VÀ AXIT BẰNG SUNFAT XANH LƠ NIL (THEO CAIN) .294
104. NHUỘM LIPIT TRUNG TÍNH VÀ AXIT BẰNG SUNFAT XANH LƠ NIL (THEO
MENSCHICK) …………………………………………………………………………………………………………….297
105. NHUỘM LIPIT TRUNG TÍNH VÀ AXIT BẰNG SUNFAT XANH LƠ NIL (THEO
DUNNIGAN) ………………………………………………………………………………………………………………300
106. NHUỘM PHÁT HIỆN ADENOSIN TRIPHOSPHATAZE (ATPase) …………………………………303
107. NHUỘM PHOTPHATAZA KIỀM …………………………………………………………………………………307
108. NHUỘM GOMORI CHÌ PHÁT HIỆN PHOSPHATAZA AXIT ………………………………………..310
V. C¸c quy tr×nh kü thuËt miÔn dÞch vµ sinh häc ph©n
tö ……………………………………. Error! Bookmark not defined.
109. NHUỘM HÓA MÔ MIỄN DỊCH CHO MỘT DẤU ẤN (cho các mảnh cắt parafin) ……………..313
110. NHUỘM MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG TRỰC TIẾP PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN ……317
111. NHUỘM MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG GIÁN TIẾP PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN ……319
112. KỸ THUẬT KHÁNG BỔ THỂ HUỲNH QUANG PHÁT HIỆN KHÁNG NGUYÊN ………….321
113. NHUỘM MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG GIÁN TIẾP PHÁT HIỆN KHÁNG THỂ…………….323
114. KỸ THUẬT ỨC CHẾ HUỲNH QUANG PHÁT HIỆN KHÁNG THỂ ……………………………….325
115. KỸ THUẬT KHÁNG BỔ THỂ HUỲNH QUANG PHÁT HIỆN KHÁNG THỂ ………………….327
116. KỸ THUẬT LAI TẠI CHỖ GẮN HUỲNH QUANG (FISH) …………………………………………….329
117. KỸ THUẬT LAI TẠI CHỖ CÓ GẮN CHẤT MÀU (CISH ) ……………………………………………..333
118. KỸ THUẬT PCR ………………………………………………………………………………………………………….337
119. XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN EGFR BẰNG GIẢI TRÌNH TỰ CHUỖI DNA TRÊN KHỐI
PARAFIN ……………………………………………………………………………………………………………………340
120. XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN K-RAS BẰNG GIẢI TRÌNH TỰ CHUỖI DNA TRÊN KHỐI
PARAFIN ……………………………………………………………………………………………………………………343
vi. C¸c quy tr×nh kü thuËt tÕ bµo häc ……………………………346
121. NHUỘM SHORR …………………………………………………………………………………………………………346
122. NHUỘM PAPANICOLAOU ………………………………………………………………………………………….349
123. NHUỘM DIFF- QUICK ………………………………………………………………………………………………..352
124. NHUỘM GIEMSA TRÊN PHIẾN ĐỒ ……………………………………………………………………………354
125. NHUỘM HEMATOXYLIN – EOSIN TRÊN PHIẾN ĐỒ ………………………………………………….357
126. NHUỘM MAY – GRüNWALD – GIEMSA …………………………………………………………………….360
127. NHUỘM PAS KẾT HỢP XANH ALCIAN …………………………………………………………………….363
128. NHUỘM PHÁT HIỆN GLYCOGEN THEO BEST ………………………………………………………….365
129. KỸ THUẬT LẤY BỆNH PHẨM LÀM PHIẾN ĐỒ CỔ TỬ CUNG – ÂM ĐẠO …………………367
130. KỸ THUẬT LIQUI – PREP CHẨN ĐOÁN TẾ BÀO CỔ TỬ CUNG – ÂM ĐẠO ……………….370
131. CHỌC HÖT BẰNG KIM NHỎ (FNA) CÁC HẠCH LIMPHÔ NGOẠI VI …………………………373
132. CHỌC HÖT BẰNG KIM NHỎ CÁC TỔN THƢƠNG VÖ SỜ THẤY ĐƢỢC …………………… 377
133. CHỌC HÖT BẰNG KIM NHỎ CÁC TỔN THƢƠNG CỦA DA VÀ MÔ MỀM NÔNG …….. 381
134. CHỌC HÖT BẰNG KIM NHỎ TUYẾN GIÁP ………………………………………………………………. 385
135. CHỌC HÖT BẰNG KIM NHỎ MÀO TINH HOÀN ……………………………………………………….. 389
136. CHỌC HÖT BẰNG KIM NHỎ TINH HOÀN ………………………………………………………………… 393
137. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC BONG CÁC DỊCH MÀNG BỤNG, MÀNG PHỔI, MÀNG TIM 397
138. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC NƢỚC TIỂU ……………………………………………………………………… 400
139. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC ĐỜM …………………………………………………………………………………. 403
140. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC DỊCH RỬA VÀ HÖT PHẾ QUẢN ……………………………………….. 406
141. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC DỊCH CHẢI PHẾ QUẢN…………………………………………………….. 409
142. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC DỊCH RỬA Ổ BỤNG ………………………………………………………….. 412
143. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC DỊCH KHỚP ……………………………………………………………………… 415
144. KỸ THUẬT TẾ BÀO HỌC DỊCH CÁC TỔN THƢƠNG DẠNG NANG ………………………….. 418
145. KỸ THUẬT KHỐI TẾ BÀO DỊCH CÁC KHOANG CƠ THỂ …………………………………………. 421
146. KỸ THUẬT KHỐI TẾ BÀO BỆNH PHẨM CHỌC HÖT KIM NHỎ ………………………………… 424
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất