Một số kết quả định nhóm hla trên các cặp ghép tại bệnh viện nhi Trung Ương

Định nhóm HLA (Human Leukocyte Anti- gen) một cách chính xác là một xét nghiệm không  thể  thiếu,  quyết  định thành  công  đối với   ghép   tạng   cũng   như  ghép   tuỷ   xương. Phương pháp sinh học phân tử xác định HLA lớp  I và  II có  độ  chính xác  và  độ  nhạy  cao đang được thay thế hoàn toàn phương pháp huyết  thanh  học  kinh  điển.  Từ  năm  2006, bệnh viện Nhi Trung ương đã áp dụng phương pháp sinh học phân tử SSOP (Sequence Spe- cific Oligonucleotide Prope) định nhóm HLA trong ghép tạng và ghép tuỷ xương. Thông qua những  kết  quả  đã  làm  được,  bài  báo  này nhằm mục tiêu:

1. Xác định nhóm allel và những haplotype thường gặp.

2. Xác  định mức  độ  phù  hợp  của  các  cặp ghép có liên quan gia đình và người ngoài.

II. ĐỐI   TƯỢNG   VÀ   PHƯƠNG   PHÁP NGHIÊN CỨU

1. Đối tượng nghiên cứu

68 người  gồm  người  nhận  và  ứng  cử  viên cho tạng hoặc tuỷ xương trong gia đình hoặc người ngoài.

Mẫu xét nghiện và kỹ thuật: 3ml máu chống đông   EDTA.   Tách   DNA   bằng   kit   Wizard Geromic – Promega. HLA – A, – B, – C, – DR được xác định bằng phương pháp SSOP với bộ kit của hãng INNO – LIPA (INNOGENETICS – Bỉ).

Nguyên lý: dựa vào nguyên lý lai đảo ngược. Khuyếch đại đặc hiệu các locus HLA bằng phản ứng PCR (Polymerase chain reaction), sau đó lai với những probe oligonucleotide đặc hiệu được gắn chặt như những đường song song trên màng của  những  strip, sau đó  phát  hiện  bằng  phản ứng lên màu và phân tích qua phần mềm LIRAS for LIPA HLA.

2. Phương pháp nghiên cứu

Tiền  cứu,  cắt  ngang, mô  tả.   Sử  dụng  thuật toán xác suất thống kê tìm tần suất các nhóm allel, haplotype thường gặp cũng như một số chỉ số khác.

Định nhóm HLA (Human Leukocyte Antigen) bằng phương pháp sinh học phân tử SSOP (Sequence Specific Oligonucleotide Prope) đối với HLA – A, – B, – C, – DRB1 tại Bệnh viện nhi trung ương. Mục tiêu: xác định nhóm allel và những haplotype thường gặp – Xác định mức độ phù hợp của các cặp ghép có liên quan gia đình và người ngoài. Đối tượng nghiên cứu: 68 người, gồm người nhận và ứng cử viên cho tuỷ và cho tạng. Phương pháp nghiên cứu: tiến cứu, cắt ngang, mô tả. Kết quả và kết luận: các nhóm allel thường gặp: A*11, A*02, A*24, A*33; B*15, B*07, B*38, B*40, B*46, B*58; C*07, C*08, C*03, C*01; DRB112, DRB115, DRB104, DRB107, DRB109. Một số haplotype thường gặp: A*11 – B*15, A*02 – B*15, A*24 – B*15, A*33 – B*58; C*08 – B*15; B*15 – DRB112, B*15 – DRB115; A*11 – C*08 – B*15. Mức độ phù hợp đối với các cặp ghép: quan hệ gia đình {anh em, bố (mẹ), chú cháu } 84,6% phù hợp mức từ 4/8 đến 8/8 allel; Trong đó phù hợp hoàn toàn: cặp 2 anh (chị) em là 21,43% và cặp 3 anh (chị) em là 40%. Người ngoài mức độ phù hợp rất thấp chỉ từ 4/8 xuống 0/8 allel.