NGHIÊN CứU BIểU HIệN PROTEIN PANTON VALENTINE LEUKOCIDIN CủA VI KHUẩN STAPHYLOCOCCUS AUREUS

NGHIÊN CUSU BIỂU HIỆN PROTEIN PANTON VALENTINE LEUKOCIDIN CỦA VI KHUẨN STAPHYLOCOCCUS AUREUS

ÂN KHẮC HUY, NGUYỄN THỊ PHƯƠNG LAN, DIỆP THẾ TÀI, Viện Pasteur Tp.Hồ Chí Minh

 TÓM TẮT:

Đặt vấn đề: Panton Valentine leukocidin (PVL) là một trong những độc tố liên quan đến hoại tửmô, làm tăng  độc lực,  đóng vai trò quan trọng trong khả năng xâm nhiễm của các chủng vi khuẩn S. aureus. Nghiên cứu biểu hiện protein PVL là bước  đầu trong việc nghiên cứu vai trò gây bệnh cũng nhưtầm soát phân bốPVL trong cộng  đồng và nhiễm trùng bệnh viện hiện nay.Phương pháp:  PCR  được dùng trong thu nhận gen mục tiêu  lukS-PV  mã hóa PVL-S.  Kỹthuật tạo dòng  được sửdụng  đểtạo ra vector tái tổhợp pET22b-PVL-S. Biểu hiện PVL-S  được cảm ứng bằng IPTG, được khẳng định bằng điện di SDS-PAGE và lai Western blot với kháng thểkháng His.  Kết quả:  GenlukS-PV  thu  được  đúng  kích  thước dự  kiến là 375 bp. Vector tái tổ  hợp  sau khi kiểm tra bằng PCR, enzyme cắt hạn chếvà giải trình tựcho kết quảgen lukS-PV chèn  đúng chiều và đồng khung trong vector pET22b. Protein PVL-S  đã  được biểu hiện thành công với kích thước 18 kDa khi chuyển vector pET22b-PVL-S vào tế bào BL21(DE3). Kết luận: Protein PVL được biểu hiện thành công,  đây là  cơ  sở  cho những nghiên  cứu tiếp theo vềprotein PVL-S trong việc tạo kháng thể và nghiên cứu quy trình thu sinh khối lớn protein này đang được tiếp tục triển khai.