Nghiên cứu chế tạo Nucleoprotein tái tổ hợp của vi rút dại định hướng phát triển các sinh phẩm chẩn đoán

Nghiên cứu chế tạo Nucleoprotein tái tổ hợp của vi rút dại định hướng phát triển các sinh phẩm chẩn đoán
Tác giả: Nguyễn Thị Kiều Anh, Nguyễn Vĩnh Đông, Nguyễn Tuyết Thu, Satoshi Inoue, Minoru Tobiume
Tóm tắt:
Trong những năm gần đây, Việt Nam đang phải đối mặt với sự gia tăng các ca bệnh dại. Việc nghiên cứu các kỹ thuật và sản xuất sinh phẩm chẩn đoán nhanh hỗ trợ cho giám sát, phát hiện bệnh dại ở ổ chứa, vector là điều quan trọng giúp cho chương trình phòng chống bệnh dại hiệu quả. Mục tiêu đề tài nhằm nghiên cứu chế tạo kháng nguyên tái tổ hợp nucleoprotein của vi rút dại định hướng phát triển sinh phẩm chẩn đoán. Để đạt được sản lượng protein cao và dễ dàng tinh chế trên nước nổi nuôi cấy tế bào, protein N của vi rút dại được đồng biểu hiện với protein 3xFlag trên tế bào động vật có vú 293T thông qua việc tách dòng đoạn gen mã hóa protein N chèn vào plasmid pCAGGS chứa đoạn gen mã hóa protein 3xFLAG được tách từ plasmid p3xFLAG-CMV-8. Kết quả đã thiết kế được plasmid mang gen mã hóa protein N của vi rút dại và protein 3xflag. Thử nghiệm chuyển nhiễm, đồng biểu hiện protein 3xFLAG – N của vi rút dại trên dòng tế bào 293T cho thấy từ 100ml nước nổi nuôi cấy tế bào tinh chế được 1,6mg kháng nguyên tinh khiết với nồng độ 0,8mg/ml. Cần có những nghiên cứu tiếp để xây dựng hệ thống ngân hàng chủng giống tế bào và hoàn thiện quy trình tinh chế protein ứng dụng cho việc phát triển các sinh phẩm chẩn đoán và nghiên cứu vi rút dại.