Melamin là chất được sử dụng chủ yếu trong công nghiệp chế biến chất dẻo. Nhưng một số nhà sản xuất thực phẩm đã trộn trái phép melamin vào sản phẩm của mình để làm tăng hàm lượng protein một cách giả tạo (nhằm qua mặt sự kiểm soát của các cơ quan chức năng)
Năm 2007, nhiều nước trên thế giới cũng đã đối mặt với vấn đề này khi hàng loạt động vật nuôi bị chết do ăn phải thức ăn có melamin. Năm 2008, tại Trung Quốc, melamin được phát hiện thấy trong sữa là nguyên nhân gây sạn thận cho người sử dụng, đặc biệt là trẻ em. Trên thị trường Việt Nam có rất nhiều các loại sữa nhập khẩu từ Trung Quốc, do đó đòi hỏi phải có sự kiểm tra kỹ lưỡng nhằm đảm bảo sự an toàn cho sức khỏe người sử dụng.
Hiện nay, có rất nhiều phương pháp xác định melamin. Trong đó, sắc ký lỏng ghép khối phổ (LC/MS) là một phương pháp có độ nhạy, độ chính xác cao và kết quả phân tích mang tính khẳng định phù hợp với phát hiện melamin ở nồng độ ppb. Do vậy, chúng tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu phân tích phát hiện melamin trong sữa bằng sắc ký lỏng khối phổ LC/MS ” với hai mục
tiêu:
– Nghiên cứu phân tích melamin trong sữa bằng sắc ký lỏng khối phổ.
– Khảo sát độ nhiễm của melamin trong một số mẫu sữa.
2. ĐỐI TƯỢNG – PHƯƠNG PHÁP
2.1. Đối tượng
Đối tượng nghiên cứu là melamin trong sữa. Mẫu nghiên cứu sử dụng bốn chế phẩm:
1. Sữa bọt SKIM MILK POWDER ( Số lô: SB021207, Fonterra -Newzealand )
2. Sữa bột WHOLE MILK POWDER (Số lô: 0080865657, Fonterra -Newzealand )
3. Sữa bột IMECAL PLUS (Số lô: 010308, Công ty CPDP Imexpharm )
4. Sữa bột IMESURE (Số lô: 020607, Công ty CPDP Imexpharm )
2.1. Phương pháp nghiên cứu
2.1.1. Xử lý mẫu
– Chiết bằng acid tricloracetic (TCA): Cân chính xác vào ống ly tâm 50ml khoảng 2g (đối với mẫu rắn) hoặc 5g (đối với mẫu lỏng, sệt). Thêm 15ml TCA 1% lắc đều, lắc khoảng 1 phút bằng máy lắc, siêu âm 30 phút. Ly tâm với tốc độ 5000 vòng/phút trong 5 phút, hút lớp dịch lọc đem đi phân tích.
– Làm sạch và làm giàu mẫu bằng chiết pha rắn: Cột SPE SCX 500mg/3ml (Phenomenex) hoặc
tương đương được hoạt hoá bằng 6ml (3 lần x 2ml) dung dịch MeOH, 6ml nước và 6ml dung dịch TCA 1%. Chuyển toàn bộ dịch chiết TCA mô tả ở trên vào cột với tốc độ khoảng 1-
2ml/phút. Cột được rửa tạp bằng 3ml nước cất và 3ml MeOH. Hút khô cột trong 1 phút. Rửa giải bằng chính xác 2ml x 2 lần hỗn hợp MeOH: NH4OH (95:5), lưu ý để dung môi rửa giải thấm vào cột trong 1 phút trước khi rửa giải, tốc độ rửa giải không quá 2ml/phút. Thu dịch rửa giải vào ống nghiệm. Dịch rửa cô bằng khí N2 đến cắn, thêm 2ml hỗn hợp ACN : dd PFPA (5:95).
– Đánh giá phương pháp chiết và làm sạch ( Dựa vào tỷ lệ thu hồi trên mẫu nhiễm )
2.1.2. Định tính và định lượng melamin chiết ra từ mẫu sữa bằng LC/MS
– Khảo sát xây dựng chương trình sắc ký khối phổ phân tích melamin
– Đánh giá phương pháp: Khảo sát độ tuyến tính, độ lặp lại, độ đúng, xác định giới hạn phát hiện
(LOD) và giới hạn định lượng (LOQ)
– Xử lý số liệu: Microsoft Excel
Tôi muốn tham khảo tài liệu này