Nghiên cứu phát hiện chlamydia pneumonia gây viêm đường hô hấp cấp bằng phương pháp pcr

Viêm đường hô hấp cấp (ARI) là một trong những bệnh nhiễm trùng thường gặp ở tất cả các độ  tuổi,  đặc  biệt  chiếm  một  tỷ  lệ  cao  trong nhóm  trẻ  độ  tuổi  dưới  5 tuổi  và  độ  tuổi  đến trường [1; 6; 7; 8; 10]. Căn nguyên gây viêm đường hô hấp cấp là do virus hoặc vi khuẩn [1; 2; 6; 7], trong đó Chlamydia pneumonia là một trong những căn nguyên chính gây viêm phổi, viêm phế quản, viêm họng và viêm xoang [2; 3; 4; 8; 9]. Hầu hết các trường hợp nhiễm trùng đuờng  hô  hấp  do C. pneumonia có  biểu  hiện lâm sàng ở thể nhẹ hoặc ít biểu hiện [2; 4; 8; 10]. Theo những  nghiên  cứu  trên  thế  giới  về giám sát huyết thanh học, tỷ lệ kháng thể kháng C.pneumonia lưu hành trong máu bệnh nhân từ 50 – 70% [2]. Nhiều nghiên cứu cũng đã chỉ ra vai trò và mối liên quan của C. pneumonia trong bệnh tắc nghẽn phổi mắc phải (COPD) [3; 8; 9], các bệnh về hệ thần kinh như bệnh đa xơ cứng (Multiple Sclerosis) [3; 8; 9], bệnh hen suyễn và bệnh liệt rung (Alzheimers) [8; 9]. Quan trọng hơn, nhiều nghiên cứu cho thấy vai trò của C.pneumonia đối với các bệnh liên quan tới xơ vữa động mạch, thành mạch [3; 4; 8; 9]. Ở Việt Nam hiện  chưa có  nghiên  cứu  nào  cũng  như phát triển các kỹ thuật sinh học phân tử để chẩn đoán, xác định C.pneumonia. Do vậy, chúng tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu phát hiện Chlaymydia pneumonia gây viêm đường hô hấp cấp bằng phương pháp PCR” với mục tiêu:

Xây dựng và áp dụng qui trình kỹ thuật PCR để xác định Chlamydia pneumonia.

I. ĐỐI   TƯỢNG   VÀ   PHƯƠNG   PHÁP NGHIÊN CỨU

1. Đối tượng nghiên cứu

Các  mẫu  ADN  chuẩn  chủng  C.pneumonia

KKp – 2 và C.pneumonia TW183 được cung cấp từ phòng thí nghiệm Chlamydiae và Risketchiae, Viện Nghiên cứu các bệnh truyền nhiễm Quốc gia, Nhật Bản.

Các mẫu bệnh phẩm dịch họng của 50 bệnh nhân viêm đường hô hấp cấp được cung cấp từ Trung tâm Cúm Quốc gia, viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương sau khi đã tiến hành sàng lọc có kết quả âm tính với các tác nhân là virus Cúm, virus H5N1 và các virus hô hấp khác.

Vật liêu: bộ  sinh phẩm Qiagen Kit dùng để tách triết ADN từ vi khuẩn. Hoá chất sinh phẩm chuẩn của các hãng trên thế giới. Trình tự cặp mồi sử dụng cho phản ứng PCR do hãng Invitro- gen cung cấp: