Những biên đổi hình thái của tinh hoàn chuột cong trắng trưởng thành dưới tác động của nhiệt

72 chuột cống trắng chủng Rattus, giống đực trưởng thành, chia làm 2 nhóm: nhóm nhúng nước 450c mỗi lần 30 phút, ngày một lần và kéo dài 15 ngày, gồm 36 con; nhóm chứng (nhúng nước bình thường 30°C) 36 con. Sau nhúng 24 giờ, 10 ngày, 21 ngày và 35 ngày giết chuột, quan sát cấu trúc vi thể tinh hoàn, cáctácgiả nhận thấy:
Tổn thương xung huyết tổ chức kẽ ở lô sau nhúng 24 giờ; Tổn thương xung huyết tổ chức kẽ, ống sinh tinh và thoái hoá biểu mô tinh dạng hốc hóa ở lô 10 ngày; Tổn thương xung huyết tổ chức kẽ, ống sinh tinh và thoái hoá biểu mô tinh dạng hốc hóa và đông vón ở lô 21 ngày; Tổn thương xung huyết tổ chức kẽ, ống sinh tinh và thoái hoá biểu mô tinh dạng hốc hóa, đông vón, rỗng hoá và teo nhỏ kích thước ống sinh tinh ở lô 35 ngày sau khi nhúng
Trọng lượng tinh hoàn chuột giảm nhiều so với nhóm chứng. Đường kính ống sinh tinh các lô 21, 35 ngày sau nhúng teo nhỏ. Nồng độ testosteron huyết thanh giảm nhiều ở lô 21,35 ngày sau nhúng.
Từ lâu, tác hại của nhiệt lên chức năng của tinh hoàn đã được nhiều nhà khoa học nói đến đặc biệt là chức năng sinh tinh trùng [1], [2].
Trên thế giới việc nghiên cứu tác hại của nhiệt đối với tinh hoàn động vật đã được nhiều nhà khoa học quan tâm. Bowler, 1972, nghiên cứu về nhiệt tác động lên tinh hoàn và tácđộng này được lặp lại nhiều lẩn, nhận thầy rằng khối lượng tinh hoàn sẽ giảm sút kéo dài trong nhiều tháng [5]. Setchell, 1998, khi nghiên cứu tác hại của nhiệt lên tinh hoàn động vật đã ghi nhận một cách rõ ràng những tổn thương do nhiệt gây nên, mặc dầu những tổn thương này sẽ được hổi phục sau một thời gian nếu động vật chỉ bị một lẩn phơi nhiễm [10].
Để xây dựng mô hình gây suy giảm chức năng tinh hoàn phục vụ cho một phẩn nội dụng của luận án chúng tôi tiến hành đề tài này nhằm giải quyết các mục tiêu sau:
1.    Mô tả sự biến đổi cấu trúc tinh hoàn chuột và hình ảnh vi thể của tế bào dòng tinh dưới tác động của nhiệt.
2.    Xác định nồng độ testosteron huyết thanh của chuột dưới tác dụng của nhiệt lên tinh hoàn
II.    ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1.    Đôi tượng nghiên cứu
72 chuột cống trắng đực, chủng Rattus, 3 tháng tuổi có trọng lượng trung bình là: (205 ± 27,8g). Tất cả chuột đều được nuôi trong phòng thí nghiệm với cùng điều kiện nhiệt độ, độ ẩm, thời gian sáng/tối là 12/12 h. Thức ăn và nước uống được cung cấp đẩy đủ. Chuột được chia thành hai nhóm: nhóm nghiên cứu và nhóm chứng.
2.2.    Chỉ sô’nghiên cứu
I.Trọng lượng tinh hoàn (tính ra mg/100g trọng lượng chuột); 2. Nồng độ testosteron huyết thanh.; 3. Cấu trúc vi thể tinh hoàn.
2.3.    Phương pháp nghiên cứu
2.3.1.    Gây suy giảm chức năng tinh hoàn
Chuột được chia làm 2 nhóm:
+ Nhóm nhúng: 36 chuột được cốđịnh và treo theo chiều thẳng đứng vào một chiếc giá.

Đề tài được thực hiện tại Bộ mồn Môphôi, Sinh lý học, Đại Học Y Hà Nội 20
Đặt chiếc giá đã được treo chuột vào buồng nước được ổn định ở 45°c. Điều chỉnh lượng nước trong buồng ngâm cho ngập toàn bộ tinh hoàn chuột. Bật đổng hổ tính giờ. Thời gian ngâm tinh hoàn chuột trong nước45°C là 30 phút, ngày ngâm 1 lẩn và được lặp lại hằng ngày trong khoảng thời gian 15 ngày. Nước 45°c được cấp và kiểm soát nhiệt độ bằng buồng ổn nhiệt của Nhật, có nhiệt độ sai số tối đa không quá 0,1 °c.
+ Nhóm chứng: 36 chuột , nhúng nước bình thường 30°c.
2.3.2.    Cách theo dõi
Chuột của 2 nhóm được nuôi trong cùng điều kiện. Sau 24 giờ, 10 ngày, 21 ngày và 35 ngày, giết chuột tách lấy tinh hoàn để cân và xem cấu trúc, lấy máu để định lượng testosteron.
2.3.3.    Kỹ thuật tách lẩy tinh hoàn
Giết chuột bằng cách cắt đẩu, sau đó mở bìu, bụng chuột để cắt lấy tinh hoàn, bóc sạch phẩn tổ chức mỡ dính xung quanh, đặt ngay 3 cơ quan này lên giấy lọc có thấm dung dịch nước muối sinh lý ở trong các đĩa Petri cho đến khi cân, cân xong cho ngay tinh hoàn vào dungdịch Bouin, đểcốđịnh và làm tiêu bản.
2.3.4.    Cân trọng lượng tinh hoàn
+ Cân tinh hoàn chuột bằng cân điện tử MJ seriors 300 của Nhật, có độ sai lệch tối đa không quá 0,1 mg.
2.3.5.    Định lượng testosteron
+ Lấy máu để đông, quay ly tâm, chắt lấy huyết thanh, định lượng testosteron bằng kỹ thuật ELISA.
2.3.6.    Hoàn thành tiêu bản mô học
Cắt tinh hoàn thành nhiều miếng theo mặt cắt ngang các ống sinh tinh, cố định tiếp bằng Bouin, đúc khối paraffine, cắt lát mỏng, mỗi lát có chiều dày 5 đến 7àm, mỗi tinh hoàn lấy 5 lát, mỗi lát cách nhau khoảng 30 àm, nhuộm 2 mẩu Hematoxylin – Eosin.