Phân bố các gen mã hoá coagulase ở các genotype của staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus là căn nguyên của nhiều loại nhiễm trùng khác nhau, trong đó có những bệnh rất nặng. Xác định các gen quy định yếu tố độc lực có ý nghĩa quan trọng trong chẩn đoán, nghiên cứu về cơ chế gây bệnh, dịch tễ học phân tử. Nghiên cứu nhằm xác định sự phân bố các gen mã hóa coagulase ở các genotype của S. aureus phân lập từ nhân viên làm việc tại cơ sở dịch vụ ăn uống ở Hà Nội. Kết quả cho thấy sáu genotype của gen mã hóa coagulase đã được xác định, có 1 genotype chiếm ưu thế (66,2%), các genotype phân bố với tỷ lệ khác nhau ở các chủng phân lập được từ mũi và tay, có 91,2% người mang S. aureus với 1 loại genotype, 8,8% người mang S. aureus với 2 hoặc 3 loại genotype. Sáu genotype của gen mã hóa coagulase đã được xác định, genotype 6 chiếm ưu thế (66,2%). Có 91,2% người mang S. aureus với 1 loại genotype. Một người có thể mang S. aureus với hơn 1 loại genotype.

Staphylococcus aureus là một trong những vi khuẩn hay gặp nhất trên cơ thể người. S.aureus cũng là căn nguyên của nhiều loại nhiễm trùng khác nhau, trong đó thường gặp là nhiễm trùng ngoài da, ngộ độc thực phẩm, viêm xương tuỷ, nhiễm khuẩn huyết, nhiễm trùng bệnh viện [2]. Vị trí cư trú hay gặp nhất của S.aureus là lỗ mũi trước. S.aureus có thể cư trú thường xuyên, không thường xuyên và không cư trú trên cơ thể người [1]. Coagulase là một trong những yếu tố độc lực ngoại bào của S.aureus. Đây là enzyme làm đông huyết tương và là một chỉ điểm để phân biệt S. aureus với các tụ cầu gây bệnh khác [9]. Hiện nay, các nghiên cứu về dịch tễ học phân tử của S. aureus còn rất hạn chế. Gen mã hóa coagulase có tính đa hình thái. Việc phân loại dựa vào gen mã hóa coagulase đơn giản, có độ nhạy và độ đặc hiệu cao [5]. Vì vậy, chúng tôi tiến hành đề tài nghiên cứu này với mục tiêu: Xác định sự phân bố các gen mã hóa coagulase ở các genotype của S.aureus phân lập từ nhân viên làm việc tại cơ sở dịch vụ ăn uống ở Hà Nội.
II.    ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
1.    Đối tượng
47 chủng S. aureus phân lập được từ tay và mũi của 103 nhân viên làm việc tại 5 cơ sở dịch vụ ăn uống ở Hà Nội, tiếp xúc trực tiếp với thức ăn. Thời gian nghiên cứu: từ tháng 3/2009 đến 9/2010.
2.    Phương pháp
–    Lấy bệnh phẩm bằng tăm bông vô trùng ở cả 2 bàn tay và 2 lỗ mũi ngoài 4 lần, cách nhau 1 tuần. Nuôi cấy phân lập, lưu giữ chủng [1]. Tách DNA. Tiến hành kỹ thuật PCR [6], cắt bằng enzyme AluI (hãng Fermentas, Canada), máy PCR (Mastercycler gradient, Eppdorf, Đức), hệ thống điện di (Bộ điện di ngang Horizon 58-Gibco-BRL, Anh), hệ thống chụp ảnh (máy Geldoc, hãng BioRad, Pháp).