Phân tích và phát hiện 10 trường hợp đột biến gen Dystrophin ở 33 bệnh nhân Việt Nam được chẩn đoán Duchenne vỡ Becker

Phân tích và phát hiện 10 trường hợp đột biến gen Dystrophin ở 33 bệnh nhân Việt Nam được chẩn đoán Duchenne vỡ Becker

Bệnh DMD vỡ BMD là bệnh di truyền lặn liên kết giới tính, do đột biến trên gen dystrophin gây nên.Đột biến phổ biến nhất là đột biến xóa đoạn, các đột biến mất đoạn này phân bố ngẫu nhiên suốt chiều dỡi gen nhưng chủ yếu tập trung ở một số exon. Mục tiêu: Xác định đột biến xoá đoạn các exon của gen Dystrophin của bệnh nhân DMD vỡ BMD của Việt Nam bằng kỹ thuật PCR. Đối t-ợng vỡ ph-ơng pháp: phân tích ADN của 33 bệnh nhân Việt Nam đ-ợc chuẩn đoán lâm sỡng lỡ DMD/BMD bằng ph-ơng pháp PCR sử dụng 22 cặp mồi để nhân 22 exon. Xác định các exon bị xoá đoạn bằng điện di sản phẩm PCR. Kết quả: Chúng tôi đã phát hiện đột biến xóa đoạn ở 10 tr-ờng hợp. Tất cả các tr-ờng hợp bị đột biến đều lỡm lệch khung đọc vỡ gây ra triệu chứng nặng của bệnh. Các tỉ lệ nỡy phù hợp với các kết quả nghiên cứu tr-ớc đó. Kết luận: chẩn đoán DMD bằng PCR sẽ lỡ một phương pháp chẩn đoán  nhanh, chính xác vỡ đơn giản, vỡ phù hợp với điều kiện thực tế của Việt Nam hiện nay.

Bệnh Duchenne muscular dystrophy (DMD) vμ Becker muscular dystrophy (BMD) lμ một dạng bệnh cơ-thần kinh có tính di truyền phổ biến nhất  với tần xuất  lμ  1/3500 trẻ trai sau đẻ. Nguyên nhân gây bệnh lμ do những khiếm khuyết của gen Dystrophin nằm trên NST X ở vị trí Xp21. Gen Dystrophin có 2.6 triệu cặp bazơ  vμ lμ gen dμi nhất  của ng-ời nh-ng chỉ có 0.5% số bazơ (13973 bp) bao gồm 79 exon cho sản phẩm  protein. Sự phiên mã của gen dys- trophin đ-ợc kiểm soát bởi 8 promoter [3, 10].  Sản phẩm  lμ một phân tử protein dμi 3685 axit amin có trọng l-ợng phân tử lμ 427kDa. Protein dystrophin có vai trò liên kết các đĩa Z của đốt cơ (sarcomer) với mμng bao cơ (sarcolemm) [10]. Do đó, dystrophin có vai trò rất quan trọng trong cơ chế ổn định của tế bμo cơ trong suốt quá trình co cơ. Nếu đột biến gen, dys- trophin không đ-ợc tổng hợp đầy đủ dẫn  đến các tế bμo cơ vân bị teo nhỏ, thoái hoá, mμng tế bμo bị xé rách khi co cơ, lμm ảnh h-ởng đến chức năng vận động của bệnh nhân. Có khoảng 60% bệnh nhân DMD bị đột  biến xoá đoạn. Các đột biến xoá đoạn có thể xảy ra ở vị trí bất kỳ trên gen nh-ng chủ yếu tập trung ở 2 vùng hotspot (lμ vùng dễ xảy ra các đột biến xoá đoạn vμ đột điểm trên gen dystrophin). Do vậy, đầu tiên thì ng-ời ta sẽ sμng lọc 22/79 exon. Vμ với 22 exon nμy đã cho phép phát hiện đ-ợc 98% tr-ờng hợp xoá đoạn. 2/3 trong các tr-ờng hợp nμy có thể xác định  bị  dịch   khung đọc (ở DMD) hay không dịch khung (ở BMD). Còn 1/3 tr-ờng hợp còn lại phải xét đến các exon khác. Nếu đột biến xóa
đoạn không  xảy ra thì có thể xảy ra đột biến điểm hoặc các dạng đột biến khác  nh- chèn  đoạn (inser- tion), lặp đoạn  (duplication)…. Để  xác định  được chính xác thì cần phải đọc trình tự hoặc nghiên cứu ở mức độ mARN .
Nói chung, hiện nay chưa có phương pháp điều trị có hiệu quả cho DMD vμ BMD, mặc dù liệu pháp gen cũng đã được nghiên cứu vμ thử nghiệm trên cả động vật vμ thử trực tiếp trên cả ng-ời nhưng chưa có kết quả rõ rệt [4,7,8].
ở Việt Nam, việc ứng dụng các  kĩ thuật  di truyền phân  tử trong chuẩn đoán DMD/BMD còn rất hạn chế.  Việc chuẩn đoán bệnh vẫn chủ yếu dựa vào lâm sμng, xét nghiệm sinh hóa, ghi điện cơ,… do đó không thể phát hiện đ-ợc những đột biến mất  đoạn nμo của gen dystrophin thường gặp ở nước ta làm cơ sở cho việc chuẩn đoán trước sinh. Vì vậy, chúng tôi thực hiện đề tài này với mục tiêu:
 

Thông tin này hy vọng sẽ gợi mở cho các bạn hướng tìm kiếm và nghiên cứu hữu ích

Leave a Comment