PHÁT HIỆN NHIỄM SẮC THỂ PHILADELPHIA TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ BẠCH CẦU MÃN TÍNH DÒNG HẠT BẰNG KỸ THUẬT PCR
PHÁT HIỆN NHIỄM SẮC THỂ PHILADELPHIA TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯ BẠCH CẦU MÃN TÍNH DÒNG HẠT BẰNG KỸ THUẬT PCR
Phan Đình Điền*, Phạm Hùng Vân**, Nguyễn Thái Sơn**
TÓM TẮT
Đặt vấn đề và Mục tiêu nghiên cứu: Nhiễm sắc thể Philadelphia hiện diện trong máu ngoại biên và tủy xương của bệnh nhân ung thư bạch cầu mãn tính dòng hạt (Chronic Myeloid Leukemia-CML) với tỷ lệ lớn hơn 95%, đây là sản phẩm của sự chuyển đoạn t(9;22), trong đó ABL proto-oncogene lừ nhiễm sắc thể số 9 đến gắn vào vị trí 5’ của gene BCR trên nhánh dài nhiễm sắc thể số 22 (q34;q11). Với kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction), ở đây là RT-PCR chúng ta có thể phát hiện được gene tố hợp BCR-ABL của nhiễm sắc thể Philadelphia. Mục tiêu nghiên cứu nhằm phát hiện và tiến hành phân tích gene tố hợp BCR-ABL bao gồm BCR-ABL b2a2 và BCR-ABL b3a2 để xác định sự hiện dện của nhiễm sắc thể Philadelphia trong máu ngoại biên của bệnh nhân CML.
Đoi tượng nghiên cứu: 60 bệnh nhân được xác định chẩn đoán là CML với tủy đồ dương tính và đang được điều trị ngoại trú tại Khoa Huyết Học Bệnh viện Chợ Ray từ 05.08.2009 đến 19.11.2009.
Phương pháp và mẫu nghiệm nghiên cứu: Chúng tôi sử dụng phương pháp nghiên cứu cắt ngang, mô tả. 04 ml máu ngoại biên của bệnh nhân sẽ được lấy và cho vào tube có chất chống đông bằng EDTA. Máu toàn phần sẽ được trích ly RNA, khuếch đại 2 types của gene tố hợp BCR-ABL là b2a2 và b3a2 bằng kỹ thuật RT-PCR, tiến hành xét nghiệm định lượng Real-Time PCR nhờ 03 nồng độ chuẩn của gene fi-glucuronidase (GUS) S1:100.000 copies/ml, S2: 10.000 copies/ml và S3:1.000 copies/ml, được phát hiện real time cùng với mau nghiệm. Phân tích kết quả bằng phần mềm iQ5 Real-Time PCR System Software.
Kết quả: Phát hiện được gene tố hợp BCR-ABL trong máu ngoại biên của bệnh nhân CML với tỷ lệ 98.33% (59/60 BN) trong đó BCR-ABL b2a2: 32.20 %, BCR-ABL b3a2: 44.07 % và dạng kết hợp BCR-ABL b2a2 + b3a2 chiếm tỷ lệ 23.73 %>.
Kết luận: Những kết quả trên cho thấy có thể dùng kỹ thuật PCR để phát hiện nhiễm sắc thể Philadelphia. Việc so sánh đối chiếu kết quả này với các tác giả khác trong và ngoài nước cũng được bàn luận để khẳng định giá trị của kỹ thuật.
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất