Sử dụng kỹ thuật PCR để nhân gen NS4 của virut hepatitis C bằng enzym deep vent ADN polymerase
Tên bài báo: Sử dụng kỹ thuật PCR để nhân gen NS4 của virut hepatitis C bằng enzym deep vent ADN polymerase
Tác giả: Nguyễn Hạnh Phúc
Tên tạp chí: Y học thực hành
Năm xuất bản: 2005 Số: 2 Tập: 503 Trang: 5-6
Tóm tắt:
Quá trình nhân gen NS4 của virút Hepatitis C bằng PCR được sử dụng với cDNA bổ trợ từ ARN, cặp mồi đặc hiệu cho gen NS4 và enzym xúc tác là Deep Vent ADN polymerase. Nồng độ MgSO4 thích hợp để nhân gen NS4 là 4mM. Nhiệt độ gắn mồi cũng là yếu tố ảnh hưởng đến tính đặc hiệu của sản phẩm, kết quả điện di thấy nhiệt độ thích hợp nhất là 55 và 57 độ C. Với nồng độ 200 asM dNTPs, sản phẩm PCR là băng sắc nét đúng kích thước dự đoán ban đầu, ở nồng độ dNTPs là 50 hay 100 àM thì không quan sát được sản phẩm PCR, ở nồng độ 150 µM thì sản phẩm PCR thu được mờ hơn nhiều so với sử dụng 200 µM, như vậy nồng độ dNTPs là 200 µM
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất