Tạo và tinh chế kháng thể kháng heparansulphate interacting protein người (hhip) từ thỏ

Heparansulphate Interacting Protein người (hHIP) thuộc nhóm ribosomal protein tham gia nhiều quá trình hoạt động sống của các tế bà o. Các nghiên cứu đã khẳng định sự tăng tổ ng hợp hHIP ở cả mức độ mRNA và protein trong một số dòng tế bào và mô ung thư, đặc biệt là các dòng tế bào ung thư biểu mô ác tính. Để đánh giá sự tương đồng về mứ c độ tổng hợp protein nàyvới sự sao chép mRNA ở các mô việc có được kháng thể kháng hHIP người là cần thiết. Mục tiêu:1) Tạo kháng thể kháng hHIP người trên thỏ; 2) Tinh chế và bảo quản dài ngày kháng thể này. Đối tượng và phương pháp:Gây mẫn cảm trên thỏ sử dụng phân đoạn peptid có ái lực cao với heparin và heparansulfate trong phân tử hHIP; Tinh chế kháng thể bằng sắc ký ái lực.  Kết quả:Đã tổng hợp phân đoạn peptid, gắn phân đoạn này với protein mang; Gây miễn dịch thành cô ng trê n thỏ; Tinh chế thành công và thu được một lượng lớn kháng thể kháng hHIP người. Kết luận:Tạo và tinh chế thành công kháng thể kháng hHIP người. Nghiên cứu nàyđã thiết lập được một quy trình chuẩn tạo kháng thể đa dòng kháng một phân đoạn peptid.

Heparansulphate Interacting Protein người (hHIP) tham gia điề u hoà nhiều quá trình sống củ a
tế bào thông qua sự tương tá c với các yế u tố trong khoả ng gian bào như các protease, yế u tố phát triển… Nhiều nghiên cứ u gầ n đây cho thấ y có sự tăng tổ ng hợ p hHIP ở một số dò ng tế bà o và mô ung thư, đặc biệt ở các dò ng tế bào ung thư biểu mô ác tính; khô ng phát hiệ n thấy hHIP hoặc phát hiện mức độ rất thấp ở dò ng tế bào sợi và tổ chứ c liên kết… Mứ c độ tổ ng hợ p hHIP phụ thuộc và o mức độ biệt hoá của các dò ng tế bào ung thư. Kết quả nghiên cứ u gần đây củ a chúng tôi đã chứng minh rằng mRNA củ a hHIP tăng cường sao ché p ở các dò ng tế bào và mô ung thư đại tràng, ung thư tuyế n giáp, ung thư vú và ung thư tiền liệt tuyến
[2, 4, 6]. Từ nhữ ng kết quả đó, một câu hỏi đặt ra: Liệu mức độ tổng hợ p protein hHIP luô n đi kè m với mức độ sao ché p mRNA của hHIP và phụ thuộ c vào quá trình bệnh lý ung thư? Để trả lời câu hỏi nà y việc đánh giá mức độ sinh tổng hợ p protein hHIP bằ ng các kỹ thuật đặ c hiệ u sử dụ ng kháng thể khá ng hHIP người là hết sức cầ n thiết. Chính vì vậy, đề tài này được tiến hành nhằm mục tiêu:
1. Gắn kết phân đoạ n hHIP với protein mang, tạ o ra khá ng thể khá ng hHIP ngườ i trê n thỏ .
2. Tinh chế khá ng thể khá ng hHIP và bướ c đầ u đá nh giá sơ bộ hiệu giá kháng thể thu đượ c.