Ứng dụng kỹ thuật nested rt – pcr xác định đột biến gen bcr/abl ở bệnh nhân lơ xê mi kinh dòng bạch cầu hạt

Gen bcr/abl có ý nghĩa rất lớn trong chẩn đoán bệnh lơ xê mi dòng bạch cầu hạt. Mục tiêu: Sử dụng kỹ thuật Nested RT – PCR phát hiện những đột biến gen b3a2, b2a2, e1a2, b2a3, b3a3 ở bệnh nhân CML Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Sử dụng kỹ thuật Nested RT – PCR phân tích trên mẫu máu ngoại vi của 30 bệnh nhân CML Kết quả:28/30 bệnh nhân có gen bcr/abl; 20/30 bệnh nhân có đột biến gen b3a2, 5/30 bệnh nhân có đột biến gen b2a2, có 2/30 bệnh nhân biểu hiện phối hợp b3a2 và b2a2, 1/30 bệnh nhân có đột biến gen e1a2, 2/30 bệnh nhân âm tính. Kết luận: Hầu hết có đột biến gen b3a2, còn lại là đột biến gen b2a2 hoặc phối hợp b3a2/b2a2, 1 trường hợp có đột biến gen e1a2, 2 bệnh nhân âm tính. Không có trường hợp nào biểu hiện kiểu đột biến b3a3 hoặc b2a3.

Tiêu chuẩn vàng để chẩn đoán bệnh lơ xê mi kinh dòng bạch cầu hạt là chuyển đoạn t(9;22)(q34;q11). Trong chuyển đoạn này gen tiền ung thư c – abl trên nhiễm sắc thể số 9 nối với gen bcr trên nhiễm sắc thể số 22. Điểm đứt gãy trên gen c – abl ở intron đầu tiên, điểm đứt gãy trên gen bcr có thể ở 1 trong 3 vùng. Tuỳ vào vị trí đứt gãy trên gen bcr mà gen bcr/abl sẽ có các sản phẩm khác nhau: b3a2, b2a2, b3a3, b2a3, e1a2, e1a19…. Hai kiểu đột biếnb3a2 và b2a2 chiếm phần lớn ở các bệnh nhân CML giai đoạn mạn tính. [3, 4]. Đột biến e1a2 thường gặp ở bệnh nhân lơ xê mi cấp dòng lympho mang chuyển đoạn t(9;22) nhưng rất ít gặp ở bệnh nhân CML giai đoạn mạn tính. Trên thế giới, các kỹ thuật sinh học phân tử (RT – PCR, Nested RT – PCR, FISH, multiplex PCR) đã được ứng dụng nhiề