Ứng dụng kỹ thuật pcr đa mồi, điện di polyacrylamide, nhuộm bạc để phát hiện các locút str trong xác định huyết thống

Nghiên cứu nhằm hoàn thiện kỹ thuật PCR đa mồi, điện di    polyacrylamide,    nhuộm    bạc trong xác    định huyết thống.
Đối tượng và phương pháp: 154 cá thể từ 50 cặp nghi ngờ bố –    con,    18 gia đình có bố,    mẹ, con được phân tích ADN từ
mẫu máu, móng tay, tóc, hoặc tế bào niêm mạc miệng để xác định quan hệ huyết thống tại Viện Pháp y Quốc gia. Kết quẩ nghiên cứu: ADN tách chiết từ các mẫu sinh phẩm khác nhau bằng phương pháp chelex đều có nồng độ tương đối cao. Mầu máu cho nồng độ ADN cao nhất, tiếp đến là mẫu tế bào niêm mạc miệng, mẫu móng tay và mẫu tóc. Phản ứng PCR đa mồi theo từng bộ ba locút STR, điện di gel polyacrylamide và nhuộm bạc cho các băng rõ ràng, sắc nét. Qua phân tích 15 locút STR đã xác đinh được 55 cặp bố – con có quan hệ huyết thống với độ chính xác đạt 99,97% đến 99,999% và 13 cặp bố – con không có quan hệ huyết thống. Kết luận: Đã hoàn thiện được kỹ thuật, PCR đa mồi, điện di gel polyacrylamide và nhuộm bạc.
ứng dụng các kỹ thuật phân tích ADN là một trong những nhiệm vụ vô cùng quan trọng trong công tác giám định tư pháp phục vụ điều tra hình sự, xác định huyết thống phục vụ nhu cầu thực tiễn của xã hội. Từ năm 1985, khi lần đầu tiên Peter Gill và Alex Jeffreys ứng dụng kỹ thuật ADN vào lĩnh vực này, cho đến nay đã có rất nhiều các nhà khoa học trên thế giới đi sâu nghiên cứu và phát triển nhanh chóng. Trong giám định huyết thống, nhận dạng cá thể, người ta sử dụng các locút di truyền chứa các đoạn ADN có trình tự lặp lại ngắn còn gọi là các locút STR (Short tandem repeat) để phân tích. Các đoạn lặp lại ngắn này thường có chiều dài từ 2 đến 6 nucleotit và ở mỗi cá thể có số lần lặp lại khác nhau, do vậy các locut này có tính đa hình cao nên rất có giá trị để phân biệt cá thể. Ví dụ, locút D7S280 thường sử dụng trong giám định huyết thống có trình tự lặp lại là “GATA”. Các allen khác nhau của locút này có từ 6 đến 15 trình tự lặp lại “GATA”. Thông thường, các đoạn gen sau khi được khuếch đại bằng phương pháp PCR đa mồi sẽ được phát hiện bằng phương pháp điện di, nhuộm bạc hoặc gắn huỳnh quang [2].