Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để chọn mẫu dịch não tuỷcho phân lập virut do Muỗi truyền từ bệnh nhân có hội chứng não cấp ở miền bắc Việt Nam

Trong những năm gần đây , có rất nhiều truyền của những virut đã biết [8, 9, 10]. căn nguyên virut gây HCNC mới được phát Trong thực tế vật liệu di truyền của nhiều virut hiện, hoặc mới thấy xuất hiện ở những vùng nh- là một túi cóp nhặt (grap-bags), nó có trước đây chưa có sự lưu hành của những được một số gen từ vật chủ của nó cũng như virut này ví dụ như virut Hendra, virut viêm có được một số gen từ những virut khác. Do não Nhật bản (VNNB) ở  Australia, virut Nipah vậy vật liệu di truyền của nhiều virut trong các ở Malaysia, virut West Nile ở Mỹ [6, 8].  ởViệt họ khác nhau trong phần lớn các tr-ờng hợp Nam theo số liệu thống kê, hàng năm có rất khác nhau, nh-ng trong một số trường khoảng 2000 – 3000 tr-ờng hợp bị HCNC, hợp lại tương tự như nhau về trình tự của vật nhưng cho đến nay mới xác định đ-ợc virut liệu di truyền [3, 5]. Nên có giả thiết rằng: kết VNNB, virut đ-ờng ruột là căn nguyên, số quả xác định d-ơng tính từ mẫu bệnh phẩm còn lại có thể do nhiễm virut khác [2, 4]. chỉ đồng nghĩa với nhận định có vật liệu di 

Để phát hiện một tác nhân virut mới gây  truyền của virut trong mẫu; nhưng nếu phân bệnh, phân lập virut có ý nghĩa quan trọng lập virut từ những mẫu bệnh phẩm này , hiệu cho việc xác định tác nhân, tuy nhiên phân quả phân lập đ-ợc virut rất cao.lập virut th-ờng ít đạt kết quả do bị ảnh h-ởng 

Do vậy trong nghiên cứu này cặp mồi của của nhiều yếu tố nh- thời gian lấy mẫu, bảo 3 nhóm virut là những nhóm virut đã được xác quản và vận chuyển mẫu làm giảm hiệu giá định hoặc giả định có thể là tác nhân gây virut trong mẫu, mặt khác thời gian có kết quả HCNC [4, 9, 10] được sử dụng sàng lọc mẫu chậm. Ngược lại kỹ thuật PCR cho phép DNTđể phân lập virut gây HCNC do muỗi khuếch đại nhiều lần theo cấp số nhân những truyền ở miền bắc Việt Nam trong năm 2003

Bằng kỹ thuật RT-PCR, sử dụng mồi đột biến của 3 nhóm virut để chọn mẫu dịch não tuỷ (DNT) phân lập virut gây hội chứng não cấp (HCNC) do muỗi truyền. Xét nghiệm 53 mẫu DNTcủa bệnh nhân HCNC bằng kỹ thuật RT-PCR, xác định có 16 trường hợp dương tính với tỉ lệ nh- sau: 8/53 (15,09 %) mẫu dương tính với mồi của nhóm virut do muỗi truyền, 7/53 (12,96 %) mẫu d-ơng tính với mồi của nhóm virut tiềm tàng, 1/53 (1,88 %) mẫu dương tính với mồi của nhóm virut lây truyền qua đ-ờng tiêu hoá. Kết quả dương tính bằng kỹ thuật RT-PCR không thể thay thế kết quả phân lập, nhưng nó định hướng cho việc chọn mẫu thích hợp để phân lập virut. Sử dụng tế bào muỗi    Aedes Albopictusdòng C6/36 để phân lập virut do muỗi truyền. Từ 7 mẫu DNTxác định d-ơng tính bằng kỹ thuật RT-PCR với cặp mồi của nhóm virut do muỗi truyền, phân lập được 7 chủng virut, trong số này có 5 chủng là virut VNNB, 1 chủng là virut thuộc nhóm virut  Arbo mới được phát hiện ở Việt nam 2002, còn 1 chủng ch-a định loại đ-ợc