Ứng dụng phương pháp pcr bán định lượng và định lượng xác định mức độ sao chép của heparansulphat interacting protein (hip) ở mô ung thư

Phương pháp PCR bán định lượng và định lượng là những phương pháp đơn giản, chính xác và cho độ tin cậy tương đối cao được sử dụng rất rộng rãi để xác định mức độ biểu hiện của mỗi gen được khuyếch đại sau mỗi phản ứng PCR. Mục tiêu:Sử dụng phương pháp PCR bán định lượng và định lượng để đánh giá mức độ sao chép của Heparansulphat Interacting Protein (HIP) ở mô ung thư so với mô lành tính; so sánh kết quả của 2 phương pháp trên. Phương phá p:Tách triết mRNA tổng số từ mô ung thư và lành tính; tổng hợp cDNA; xác định mức độ sao chép của HIP sử dụng phương pháp PCR bán định lượng và định lượng. Kết quả:Cả phương pháp này đều cho kết quả tương tự như nhau; HIP được tăng cường sao chép rất rõ ở những mô ung thư trong khi đó phát hiện được rất thấp trên mẫu lành tính. Kế t luận:Mứ c độ biểu hiện của HIP ở mô ung thư và mô lành tính khác biệt nhau một cách rõ rệt. Chúng ta có thể dùng một trong hai phương pháp PCR bán định lượng và định lượngtrên để đánh giá mức độ sao chép của HIP trong chẩn đoán bệnh ung thư.

Heparin và heparansulfate (HP/HS) là đại phân tử mang điện âm với độ sulphate hóa rất cao, chính vì vậy chúng có khả năng tương tác với nhiề u loại protein trong cá c quá trình sinh họ c
khác nhau và đóng vai trò rất quan trọng trong việc hình thành và duy trì cấu trúc chứ c nă ng của tế bào [1]. Daniel D. Carson và cộ ng sự đã phát hiện ra một protein bề mặt tế bào biểu mô thậ n người và một số dòng tế bào khác, protein nà y được đặt tên là Heparansulphat Interacting Protein (HIP) [2]. Đây là một protein có chiề u dài 155 aa với trọng lượ ng phâ n tử khoảng 18 kDa [3]. Khi nghiên cứu sâ u hơn về chứ c nă ng sinh học của HIP các tác giả đã phát hiện ra rằng HIP cũng có chức nă ng tương tự như nhữ ng protein gắ n ái lực với HP/HS và chúng được tổng hợp nhiề u ở các dò ng tế bào nội mạ c và tế bà o biể u mô trưởng thành. Một số nghiên cứ u gầ n đây đã chứ ng minh rằng HIP đượ c tăng cườ ng tổng hợ p ở các dò ng tế bào và mô ung thư ở cả mứ c độ RNA thô ng tin và protein như: ung thư tuyến giáp trạng và ung thư vú, ung thư đại tràng..