Xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 gây bệnh tạo xương bất toàn (Osteogenesis Imperfecta)
Tên luận án: “Xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 gây bệnh tạo xương bất toàn (Osteogenesis Imperfecta)”.
Nghiên cứu sinh : Bùi Thị Hồng Châu
Chuyên ngành : Hóa sinh Khóa: 30 Mã số : 62720112
Cán bộ hướng dẫn: GS.TS. Tạ Thành Văn
Cơ sở đào tạo: Trường Đại học Y Hà Nội
Đột biến gen được xác định là một trong những nguyên nhân gây nên nhiều bệnh, đặc biệt là các bệnh lý di truyền và rối loạn chuyển hóa. Những tổn thương gen thường xảy ra sớm nhất. Các tổn thương này thông qua cơ chế điều hòa gen trong mối tương tác giữa các gen với nhau hoặc các gen với các phân tử nội bào hoặc mối tương tác tế bào – tế bào mà biểu hiện thành các thể bệnh nặng, nhẹ khác nhau. Các nhà khoa học trên thế giới đã đi sâu tìm hiểu cơ chế gây đột biến và kết quả cho thấy: cơ chế gây đột biến gen rất phức tạp, các kiểu/dạng đột biến đa dạng và phong phú tùy thuộc vào từng thể bệnh, mức độ năng nhẹ và có hoặc không đặc hiệu với chủng tộc. Trong giai đoạn hiện nay chúng ta chưa thể sử dụng các kỹ thuật sinh học phân tử để can thiệp nhằm ngăn ngừa sự phát sinh đột biến nhưng với mỗi một bệnh lý cụ thể các nhà khoa học hoàn toàn có thể xác định được chính xác các đột biến một cách sớm nhất để đưa ra những giải pháp can thiệp kịp thời hay các lời khuyên di truyền nhằm nâng cao hiệu quả điều trị và phòng bệnh.
Bệnh tạo xương bất toàn (osteogenesis imperfecta) còn gọi là bệnh xương thủy tinh hay bệnh giòn xương. Hơn 90% bệnh tạo xương bất toàn là di truyền trội trên nhiễm sắc thể thường. Bệnh bao gồm nhiều thể lâm sàng và có đặc điểm di truyền khác nhau với tần suất mắc bệnh 1/15.000^1/25.000 [1],[2],[3]. Nguyên nhân của bệnh là do đột biến gen tổng hợp collagen týp I dẫn đến thiếu hụt hoặc bất thường cấu trúc của phân tử collagen týp I gây nên giòn xương, giảm khối lượng xương và bất thường các mô liên kết. Collagen týp I là một loại protein chiếm ưu thế trong chất nền ở khoảng gian bào của hầu hết các mô, được tìm thấy ở xương, màng bọc các cơ quan, giác mạc, củng mạc mắt, cân và dây chằng, mạch máu, da, màng não, là thành phần chính của ngà răng và chiếm 30% trọng lượng cơ thể. Vì vậy, khi bị khiếm khuyết chất cơ bản ngoại bào, bệnh không chỉ biểu hiện bất thường ở xương mà còn bất thường ở các tổ chức khác như củng mạc mắt màu xanh, tạo răng bất toàn, giảm thính lực… [4],[5]. Bệnh tạo xương bất toàn gây đau đớn, tàn phế suốt đời cho trẻ cả về mặt thể chất lẫn tâm thần với thể bệnh nhẹ. Còn với thể bệnh nặng thì gây tỷ lệ tử vong cao.
Cho đến nay, vẫn chưa có phương pháp điều trị đặc hiệu đối với bệnh tạo xương bất toàn. Chủ yếu là điều trị triệu chứng, giảm đau, giảm gãy xương tái phát với mục đích giảm đến mức tối đa tỷ lệ tàn tật và suy giảm các chức năng, giúp cải thiện chất lượng cuộc sống cho bệnh nhân [6],[7]. Các nhà khoa học đã phát hiện ra rằng, khoảng trên 90% các trường hợp bệnh tạo xương bất toàn gây nên do đột biến gen COL1A1 và COL1A2 [8]. Từ đó đến nay, khoảng 300 dạng đột biến khác nhau trên COL1A1 và COL1A2 đã được phát hiện, trong đó đột biến phổ biến nhất được mô tả bởi Dalgleish và cộng sự năm 1997 là sự thay đổi các acid amin glycin thành một acid amin khác. Các đột biến này không tập trung ở vùng trọng điểm (hotspot) mà rải rác khắp chiều dài của gen vì vậy quá trình phân tích gen tìm đột biến tương đối khó khăn [9],[10],[11],[12]. Bằng kỹ thuật phân tích gen thì kết quả phân tích gen là tiền đề quan trọng giúp chẩn đoán trước sinh đối với các đối tượng có nguy cơ cao sinh con bị bệnh tạo xương bất toàn để đưa ra những tư vấn di truyền giúp ngăn ngừa và làm giảm tỉ lệ mắc bệnh [13],[14]. Các nghiên cứu bệnh tạo xương bất toàn ở Việt Nam vẫn còn rất ít, chủ yếu nghiên cứu về mặt lâm sàng tại bệnh viện Nhi Trung ương nên số lượng nghiên cứu về bệnh tạo xương bất toàn chưa nhiều, thông tin còn hạn chế.
Xuất phát từ thực tiễn đó, nghiên cứu này được tiến hành nhằm mục tiêu:
1.Xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 trên bệnh nhân mắc bệnh tạo xương bất toàn.
2.Xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 ở bố mẹ của bệnh nhân đã phát hiện đột biến gen COL1A1 hoặc COL1A2.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1.Kwang-Soo Lee, Hae-Ryong Song, Tae-Joon Cho, Sung-Chul Jung, and Soo Kyung Koo (2006). Mutational Spectrum of Type I Collagen Genes in Korean Patients with Osteogenesis Imperfecta. Human Mutation, 27(6).
2.Orioli I.M., Castilla E.E., Barbosa-Neto J.G. (1986). The birth prevalence rates for the skeletal dysplasias. JMed Genet, 23(4), 328-332.
3.Stoll C., Dott B., Roth M.P., Alembik Y. (1989). Birth prevalence rates of skeletal dysplasias. Clin Genet, 35(2), 88-92.
4.Anna Gajko-Galicka (2002). Mutations in type I collagen genes resulting in osteogenesis imperfecta in humans. Acta Biochimica polonica, 49, 433-441.
5.Liu W., Gu F., Ji J., Lu D., Li X., Ma X. (2007). A novel COL1A1 nonsense mutation causing osteogenesis imperfecta in a Chinese family. Mol Vis, 13, 360-365.
6.Frank Rauch, Francis H. Glorieux (2004). Osteogenesis Imperfecta.
The Lancet, 363.
7.Steiner R.D. (2013). COLA1, COLA2 – Related Osteogenesis Imperfecta.
8.National Institute of Health Osteoporosis and Related Bone Disease National Resource Centre (2012). Osteogenesis Imperfecta Overview.
9.EMQN best practice guidelines for the laboratory diagnosis of osteogenesis imperfect (2012). European Journal of Human Genetics, 20, 11-19.
10.Tedeschi E., Antoniazzi F., Venturi G., Zamboni G. and Tato L. (2006). Osteogenesis imperfecta and its molecular diagnosis by determination of mutations of type I collagen genes. Pediatric Endocrinology Reviews, 4, 40-46.
11.Roughley P.J., Rauch F. and Glorieux F.H. (2003). Osteogenesis imperfecta – Clinical and molecular diversity. European Cell and Materials, 5, 41-47.
12.Dalgleish R. (1997). The human type I collagen mutation database.
Nucleic Acids Res, 25, 181-187.
13.Van Dijk F.S. (2013). Clinical utility gene card: for osteogenesis imperfecta. European Journal of Human Genetics, 21, 6.
14.Anna GALICKA, Andrzej GINDZIENSKI (2002). Direct sequencing of PCR products for mutation detection in osteogenesis imperfecta. J. Appl.Genet. 43, 365-369.
15.Lowenstein E.J. (2009). Osteogenesis imperfecta in a 3,000-year-old mummy. Child’s Nervous System, 25(5), 515-516.
16.Constance M. Ottley (1932). Osteopsathyrosis (Lobstein’ disease): A Critical Review. Arch. Dis. Child, 7, 137-148.
17.Sillence D.O., Senn A., Danks D.M. (1979). Genetic heterogeneity in Osteogenesis Imperfecta. J. Med. Genet, 16, 101-106.
18.Buday K., Beitrage zur Lehre (1985). Osteogenesis imperfecta. Wikipedia.com
19.Nguyễn Văn Tuấn (2007). Loãng xương: nguyên nhân, chẩn đoán, điều trị và phòng ngừa. Nhà xuất bản y học, TP Hồ Chí Minh.
20.Nguyễn Văn Tuấn (2008). Các biểu thị chu chuyển xương: nguyên lý và ứng dụng. Thời sựy học, Hội y học TP Hồ Chí Minh (24), 7-19.
21.Tạ Thành Văn (2010). Con đường tín hiệu tế bào và dấu ấn sinh học trong chẩn đoán. Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội.
22.Vasikaran S., Eastell R., Bruyère O., et al (2011). Markers of bone turnover for the prediction of fracture risk and monitoring of osteoporosis treatment: A need for international reference standards. Osteoporos Int, 22, 391-420.
23.Naylor K, Eastell R. (2012). Bone turnover markers: use in osteoporosis. Nat. Rev. Rheumatol., 8, 379-389.
24.Looker A.C., Chesnut C.H. et al (2000). Clinical use of biochemical markers of bone remodeling: current status and future directions.
Osteoporos Int, 11, 467-480.
25.Seibel M.J. (2005). BioSchemical Markers of Bone Turnover Part 1: Biochemistry and Variability. Clin Biochem Rev, 26, 97-122.
26.Kadler K.E., Holmes D.F., Trotter J.A., Chapman J.A. (1996). Collagen fibril formation. Biochem J, 316, 1-11.
27.Shapiro J.R., Lietman C., Grover M. et al (2013). Phenotypic variability of osteogenesis imperfecta type V caused by an IFITM5 mutation. J
Bone Miner Res., 28(7), 1523-1530.
28.Glorieux F.H., Rauch F., Plotkin H. et al (2000). Type V osteogenesis imperfecta: a new form of brittle bone disease. J Bone Miner Res., 15(9), 1650-1658.
29.Homan E.P., Rauch F., Grafe I. et al (2011). Mutations in SERPINF1 cause osteogenesis imperfecta type VI. J Bone Miner Res., 26(12), 2798-2803.
30.Tucker T., Nelson T., Sirrs S. et al (2012). A co-occurrence of osteogenesis imperfecta type VI and cystinosis. Am J Med Genet A, 158A(6), 1422-1426.
31.Ward L.M., Rauch F., Travers R. et al (2002). Osteogenesis imperfecta type VII: an autosomal recessive form of brittle bone disease. Bone, 31(1), 12-18.
32.Pattekar M.A. (2003). Osteogenesis imperfecta. Emedicine.com.
33.Rauch F., Travers R., Parfitt A.M., Glorieux F.H. (2000). Static and dynamic bone histomorphometry in children with osteogenesis imperfecta. Bone, 26, 581-589.
34.Robert D. Steiner (2005). Osteogenesis imperfecta. GeneReviews.com.
35.AnishKaplani (2005).Osteogenesis imperfectaPediatrics.
Emedicine.com.
36.Pyung Kil Kim (1970). Osteogenesis imperfecta congenita – Five cases and review of the literature. Yonsei medical journal, 11(1).
37.Neish A.S., Winalski et al (1995). Osteogenesis imperfecta. Emedicine.com.
38.Baldridge D., Schwarze U., Morello R. et al (2008). CRTAP and LEPRE1 mutations in recessive osteogenesis imperfecta. Hum. Mutat., 29, 1435-1442.
39.Marini J.C., Cabral W.A., Barnes A.M. (2010). Null mutations in LEPRE1 and CRTAP cause severe recessive osteogenesis imperfecta.
Cell Tissue Res., 339, 59-70.
40.Van Dijk F.S., Nesbitt I.M., Zwikstra E.H. et al (2009). PPIB mutations cause severe recessive osteogenesis imperfecta. Am. J. Hum. Genet., 85, 521-527.
41.Trịnh Văn Bảo, Trần Thị Thanh Hương (2014). Di truyền y học. Nhà xuất bản giáo dục Việt Nam, 136-142.
42.Marlowe A., Pepin M.G., Byers P.H. (2002). Testing for osteogenesis imperfecta in cases of suspected non-accidental injury. J Med Genet, 39, 382-386.
43.Feng Z.Y., Chen Q., Shi C.Y., Wen H.W., Ma K., Yang H.X. (2012). A type IV osteogenesis imperfecta family and pregnancy: a case report and literature review. Chin Med J (Engl), 125, 1358-1360.
44.Oleksiy Solovyov, Yana O. Goncharova, Valeriy Zukin (2010). Osteogenesis imperfecta, type II. Clinic of reproductive medicine “NADIYA”, Kyiv, Ukraine.
45.Howitz E.M., Prockop D.J. (2001). Clinical respones to bone marrow transplantation in children with severe osteogenesis imperfecta. Blood, 5, 1227-1231.
46.Horwitz E.M., Gordon P.L. et al (2002). Isolated allogeneic bone marrow-derived mesenchymal cell engraft and stimulate growth in children with osteogenesis imperfecta: Implication for cell therapy of bone. PNAS, 13, 8932-8937.
47.Byers P.H. (2000). Osteogenesis imperfecta: perspectives and opportunities. Curr Opin Pediatr, 12, 603-609.
48.Forlino A., Marini J.C. (2000). Osteogenesis imperfecta: prospects for molecular therapeutics. Mol Genet Metab, 71, 225-232.
49.Albright J.A. (1981). Systemic treatment of osteogenesis imperfecta. Clin rthop, 159, 88-96.
50.Brumsen C., Hamdy N.A., Papapoulos S.E. (1997). Long-term effects of biphosphonates on the growing skeleton: studies of young patients with severe osteoporosis. Medicine (Baltimore), 76, 266-283.
51.Zacharin M., Bateman J. (2002). Pamidronate treatment of osteogenesis imperfecta: lack of correlation between clinical severity, age at onset of treatment, predicted collagen mutation and treatment response. J Pediatr Endocrinol Metab, 15, 163-174.
52.Van Dijk F.S., Cobben J.M., Kariminejad A., Maugeri A., Nikkels P.G.J., van Rijn R.R., Pals G. (2011.) Osteogenesis Imperfecta: A Review with Clinical Examples. Molecular Syndromology, 2, 1-20.
53.Kadler K.E., Baldock C., Bella J., Boot-Handford R.P. (2007). Collagens at a glance. J.Cell Sci, 120 (12), 1955-1958.
54.Brodsky B. and Persikov A. V. (2005). Molecular structure of the collagen triple helix. Adv. Protein Chem, 70, 301-339.
55.Sophia Millington-Ward, Helena P. McMahon, G. Jane Farrar. (2005). Emerging therapeutic approaches for osteogenesis imperfect. Trends in Molecular Medicine, 11(6), 299-305.
56.Gelse K., Poschl E., Aigner T. (2003) Collagens-structure, function, and biosynthesis. Adv. Drug Deliv. Rev, 55 (12), 1531-1546.
57.Liu S.H., Yang R.S., Al-Shaikh R., Lane J.M. (1995). Collagen in tendon, ligament, and bone healing. A current review. Clin. Orthop. Relat Res, 318, 265-278.
58.Simon M.P., Maire G., Pedeutour F. (2001). COL1A1 (collagen, type I alpha 1). Atlas Genet Cytogenet Oncol Haematol, 5(2), 78-82.
59.Elizabeth M. Perruccio, David D. Roberts (2009). COL1A2 (collagen, type I alpha 2). Atlas Genet Cytogenet Oncol Haematol, 13(2), 114-119.
60.Chu M.L., Williams C.J., Pepe G. et al (1983). Internal deletion in a collagen gene in a perinatal lethal form of osteogenesis imperfecta. Nature, 304, 78-80.
61.Pihlajaniemi T, Dickson LA, Pope FM et al (1984). Osteogenesis imperfecta: cloning of a pro-alpha 2(I) collagen gene with a frameshift mutation. J Biol Chem, 259, 12941-12944.
62.Zhang Z.L., Zhang H., Ke Y.H., et al (2012). The identification of novel mutations in COL1A1, COL1A2, and LEPRE1 genes in Chinese patients with osteogenesis imperfect. JBone Miner Metab, 30, 69-77.
63.Tạ Thành Văn, Trần Vân Khánh, Trần Huy Thịnh, Lê Minh Khôi, Nguyễn Thị Băng Sương (2011). Bệnh học phân tử. Nhà xuất bản Y học, 208-216.
64.Frank Rauch, Liljana Lalic, Peter Roughley, Francis H. Glorieux (2010). Genotype-phenotype correlations in nonlethal osteogenesis imperfecta caused by mutations in the helical domain of collagen type I. Eur JHum Genet. 18(6): 642-647.
65.Hartikka H., Kuurila K., Korkko J. et al (2004). Lack of correlation between the type of COL1A1 or COL1A2 mutation and hearing loss in osteogenesis imperfecta patients. Hum Mutat, 24, 147-54.
66.Kataoka K., Ogura E., Hasegawa K. et al (2007). Mutations in type I collagen genes in Japanese osteogenesis imperfecta patients. Pediatr Int, 49, 564-569.
67.Dale L. Bodian, Ting-Fung Chan, Annie Poon, Ulrike Schwarze, Kathleen Yang, Peter H. Byers, Teri E. Klein (2009). Mutation and polymorphism spectrum in osteogenesis imperfecta type II: implications for genotype-phenotype relationships. Human Molecular Genetics, 18, 463-471.
68.Cole W.G. (1994). Collagen genes: mutation affecting collagen structure and expression. Prog Nucl Acid Res Mol Biol, 47, 29-80.
69.Lee. Hung (2008). Diverse roles of hnRNP L in mammalian mRNA processing: A combined microarray and RNAi analysis. RNA, 14, 284-295.
70.Freud M. (2003). A novel approach to describe a U1 snRNA binding site. Nucleic Acids Research, 31(23), 6963-6975.
71.Marini J.C. (2007). Consortium for osteogenesis imperfecta mutations in the helical domain of type collagen: regions rich in lethal mutations align with collagen binding sites for integrins and proteoglycans. Hum Mutat, 28(3), 209-221.
72.Shengdong Ke and Lawrence A. Chasin (2010). Intronic Motif pairs cooperate across exons to promote pre-mRNA splicing. Genome Biology, 11:R84.
73.Dreayfuss G. (1993). hnRNP proteins and the biogenesis of mRNA. Ann.Rev.Bichem, 62, 289-321.
74.Han K. (2005). Acombinatorial Code for Splicing Silencing UAGG and GGGG Motifs. PLOSBiology, 3(5), 158.
75.Tạ Thành Văn (2010). PCR và một số kỹ thuật y sinh học phân tử. Nhà xuất bản Y học.
76.Phạm Hùng Vân (2009). PCR và real-time PCR – Các vấn đề cơ bản và các áp dụng thường gặp. Nhà xuất bản Y học.
77.Hồ Huỳnh Thùy Dương (2003). Sinh học phân tử, lần thứ 3. Nhà xuất bản Giáo dục.
78.Khuất Hữu Thanh (2006). Một số phương pháp cơ bản sử dụng trong kỹ thuật gen. Cơ sở di truyền phân tử và kỹ thuật gen. Nhà xuất bản Khoa học và kỹ thuật, 137-164.
79.McPherson M.J., Hames B.D., Taylor G.R. (1995). Optimizing PCR. PCR 2- A practical approach, Oxford University Press, 1-22.
80.Lee H.H., Morse S.A., Olsvik O. (1997). Nucleic acid amplification technologies: application to disease diagnosis. Eaton Publishing, 49-60.
81.Sorscher D.H. (1997). DNA amplification techniques. Molecular Diagnostics. Humana Press, 98-101.
82.Reece R.J. (2004). Polymerase chain reaction. Analysis of Genes and Genomes. John Wiley & Sons Ltd, 153-182.
83.Sanger F., Nicklen S. and Coulson A.R. (1977). DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc. Natl. Acad. Sci. 74(12), 5463-5467.
84.Koolman J. (2005). DNA sequencing. Color Atlas of Biochemistry, 2nd edition, 260-262.
85.Mackay K., Lund A.M., Raghunath M., Steinmann B., Dalgleish R. (1993). SSCP detection of a Gly565Val substitution in the pro alpha 1(I) collagen chain resulting in osteogenesis imperfecta type II. Hum Genet, 91(5), 439-444.
86.Cấn Thị Bích Ngọc. Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và điều trị bệnh tạo xương bất toàn tại Bệnh viện Nhi Trung ương 2000- 2009. Luận văn thạc sỹ Y học.
87.Vũ Chí Dũng, Nguyễn Thị Hoàn và cộng sự (2004). Bệnh tạo xương bất toàn do đột biến gen COL1A1 và COL1A2: Nhận xét các trường hợp được chẩn đoán và điều trị tại Bệnh viện Nhi Trung ương. Y học thực hành, 495, 42-51.
88.Penttinen P.P., Lichtenstein J.R., Martin G.R., McKusick V.A. (1975). Abnormal collagen metabolism in cultured cells in Osteogenesis imperfecta. Proc Natl Acad Sci, 72, 586-589.
89.Trelstad R.L., Rubin D., Gross J. (1977) Osteogenesis imperfecta congenita. Evidence for a generalized molecular disorder of collagen. Lab Invest, 36, 501-508.
90.Jutta Becker, Oliver Semler et al (2011). Exome Sequencing Identifies Truncating Mutations in Human SERPINF1 in Autosomal-Recessive Osteogenesis Imperfecta. Am JHum Genet, 88(3), 362-371.
91.Prockop D.J. (1985). Mutations in collagen genes. Consequences for rare and common diseases. J Clin Invest., 75(3), 783-787.
92.De Wet W.J., Pihlajaniemi T., Myers J., Kelly T.E., Prockop D.J. (1983). Synthesis of a shortened pro-alpha 2 (I) chain and decreased synthesis of pro-alpha 2 (I) chains in a proband with osteogenesis imperfecta. JBiol Chem., 258(12), 7721-7728.
93.Byers P. H., Shapiro J. R., Rowe D. W. (1983). Abnormal alpha 2- chain in type I collagen from a patient with a form of osteogenesis imperfecta. J Clin Invest., 71(3), 689-697.
94.Steinmann B., Rao V.H., Vogel A., Bruckner P., Gitzelmann R., Byers P.H. (1984). Cysteine in the triple-helical domain of one allelic product of the alpha 1(I) gene of type I collagen produces a lethal form of osteogenesis imperfecta. JBiol Chem., 259(17), 11129-11138.
95.Steinmann B., Nicholls A., Pope F.M. (1986). Clinical variability of osteogenesis imperfecta reflecting molecular heterogeneity: cysteine substitutions in the alpha 1(I) collagen chain producing lethal and mild forms. J Biol Chem., 261(19), 8958-8964.
96.Cole W.G. (1997). The molecular pathology of osteogenesis imperfecta. Clin Orthop Relat Res., 343, 235-248.
97.Ward L.M., Lalic L., Roughley P.J., Glorieux F.H. (2001). Thirty-three novel COL1A1 and COL1A2 mutations in patients with osteogenesis imperfe.cta types I-IV. Hum Mutat, 17, 434.
98.Benusiene E., Kucinskas V. (2003). COL1A1 mutation analysis in Lithuanian patients with osteogenesis imperfecta. J Appl Genet, 44(1), 95-102.
99.Pollitt R., McMahon R., Nunn J. et al (2006). Mutation analysis of COL1A1 and COL1A2 in patients diagnosed with osteogenesis imperfecta type I-IV. Hum Mutat, 27, 716.
100.Xia X.Y., Cui Y.X., Huang Y.F. et al (2008). A novel RNA-splicing mutation in COL1A1 gene causing osteogenesis imperfecta type I in a Chinese family. Clin Chim Acta, 398(1-2), 148-151.
101.Joshi Stephen, Anju Shukla, Ashwin Dalal et al (2014). Mutation spectrum of COL1A1 and COL1A2 genes in Indian patients with osteogenesis imperfecta. AJMG, 164(6), 1482-1489.
102.Fuccio A., Iorio M., Amato F., Elce A., Ingino R., Filocamo M., Castaldo G., Salvatore F., Tomaiuolo R. (2011). A novel DHPLC-based procedure for the analysis of COL1A1 and COL1A2 mutations in osteogenesis imperfecta. J Mol Diagn, 13(6), 648-656.
103.Cole W.G. (2002). Advances in osteogenesis imperfecta. Clin Orthop Relat Res., 401, 6-16.
104.Fleur S. van Dijk, Margriet Huizer, Ariana Kariminejad et al (2010). Complete COL1A1 allele deletions in osteogenesis imperfecta. Genetics in Medicine, 12(11), 736-741.
105.Bilezikian J. (2008). Principles of Bone Biology, 3rd Ed, AP, 1, 287-289.
106.Reuter M.S., Schwabe G.C., Ehlers C., Marschall C., Reis A., Thiel C., Graul-Neumann L. (2013). Two novel distinct COL1A2 mutations highlight the complexity of genotype-phenotype correlations in osteogenesis imperfecta and related connective tissue disorders. Eur J Med Genet, 56(12), 669-673.
107.Yang Z., Ke Z.F., Zeng C., Wang Z., Shi H.J., Wang L.T. (2011). Mutation characteristics in type I collagen genes in Chinese patients with osteogenesis imperfecta. Genet Mol Res, 10(1), 177-185.
108.Zhao X. and Yan S.G. (2011). Recent progress in osteogenesis imperfecta. Orthopaedic Surgery, 3, 127-130.
109.Niyibizi C., Smith P., Mi Z., Robbins P., Evans C. (2000). Potential of gene therapy for treating osteogenesis imperfecta. Clin Orthop Relat Res., 379, 126-133.
110.Paterson C.R., McAllion S., Miller R. (1983). Osteogenesis imperfecta with dominant inheritance and normal sclerae. J Bone Joint Surg Br., 65(1), 35-39.
MỤC LỤC
ĐẶT VẤN ĐỀ1
Chương 1: TỔNG QUAN3
1.1.Bệnh tạo xương bất toàn3
1.1.1.Lịch sử nghiên cứu bệnh tạo xương bất toàn trên thế giới3
1.1.2.Đặc điểm cấu tạo và quá trình chuyển hóa xương4
1.1.3.Lâm sàng và phân loại bệnh tạo xương bất toàn7
1.1.4.Cận lâm sàng11
1.1.5.Tần suất mắc bệnh tạo xương bất toàn14
1.1.6.Di truyền học bệnh tạo xương bất toàn14
1.1.7.Chẩn đoán16
1.1.8.Điều trị bệnh tạo xương bất toàn17
1.2.Cơ chế phân tử bệnh tạo xương bất toàn20
1.2.1.Cấu trúc, chức năng của protein collagen týp I20
1.2.2.Vị trí, cấu trúc, chức năng của gen COL1A1, COL1A223
1.3.Phương pháp phát hiện đột biến gen COL1A1, COL1A230
1.3.1.Phương pháp PCR30
1.3.2.Phương pháp giải trình tự gen31
1.3.3.Kỹ thuật SSCP33
1.4.Tình hình nghiên cứu trên thế giới và tại Việt Nam33
1.4.1.Trên thế giới33
1.4.2.Ở Việt Nam34
Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU35
2.1.Đối tượng nghiên cứu35
2.1.1.Nhóm bệnh35
2.1.2.Nhóm chứng36
2.2.Trang thiết bị, dụng cụ và hóa chất36
2.2.1.Trang thiết bị nghiên cứu36
2.2.2.Dụng cụ nghiên cứu37
2.2.3.Hóa chất nghiên cứu37
2.3.Phương pháp nghiên cứu40
2.3.1.Thiết kế nghiên cứu40
2.3.2.Nội dung nghiên cứu41
2.3.3.Địa điểm nghiên cứu41
2.3.4.Quy trình và các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu41
2.4.Vấn đề đạo đức trong nghiên cứu49
Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU50
3.1.Kết quả tách chiết DNA50
3.2.Kết quả xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 trên nhóm bệnh nhân
tạo xương bất toàn52
3.2.1. Kết quả xác định đột biến gen COL1A152
3.2.2. Kết quả xác định đột biến gen COL1A261
3.2.3.Kết quả đột biến trên gen COL1A1, COL1A263
3.2.4.Kết quả các điểm đột biến tại vùng exon, intron trên gen COL1A1,
COL1A264
3.3.Kết quả xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 trên bố mẹ của bệnh nhân
tạo xương bất toàn đã phát hiện đột biến gen COL1A1 hoặc COL1A267
Chương 4: BÀN LUẬN80
Kết quả tách chiết DNA80
Kết quả xác định đột biến gen COL1A1, COL1A2 trên nhóm bệnh nhân tạo
xương bất toàn81
Kết quả xác định đột biến của bố mẹ bệnh nhân tạo xương bất toàn đã phát
hiện đột biến gen COL1A1 hoặc COL1A296
KẾT LUẬN108
CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU ĐÃ ĐƯỢC CÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN NỘI DUNG LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất