XÂY DỰNG QUI TRÌNH MULTIPLEX PCR PHÁT HIỆN ĐỒNG THỜI HPV (HUMAN PAPILLOMA VIRUS) VÀ LẬU CẦU KHUẨN (NEISSERIA GONORRHOEAE)
XÂY DỰNG QUI TRÌNH MULTIPLEX PCR PHÁT HIỆN ĐỒNG THỜI HPV (HUMAN PAPILLOMA VIRUS) VÀ LẬU CẦU KHUẨN (NEISSERIA GONORRHOEAE)
Hiện tại, theo ước tính, Việt Nam có khoảng 800.000 đến 1.000.000 người mắc các bệnh nhiễm trùng lây qua đường sinh dục mỗi năm. Trong đó, HPV và Neisseria gonorrhoeae ngày càng được đặc biệt quan tâm. Các bệnh này có thể gây ra những hậu quả nghiêm trọng như: Vô sinh, lây truyền sang con (khi người phụ nữ có thai), hoặc có thể dẫn đến tử vong.
Trước đây, việc chẩn đoán các bệnh HPV và Neisseria gonorrhoeae chủ yếu bằng các phương pháp truyền thống, như là phương pháp miễn dịch đối với HPV (Human Papilloma Virus) và phương pháp nuôi cấy đối với Neisseria gonorrhoeae, nhưng các phương pháp này không đủ nhạy, thời gian kéo dài và tỏ ra kém hiệu quả.
Hiện tại, trên thế” giới cũng như ở Việt Nam, kit PCR phát hiện cùng lúc C. trachomatis và Neisseria gonorrhoeae đã được thương mại hóa. Trái lại, kit phát hiện phát hiện đồng thời HPV và Neisseria gonorrhoeae cũng có tiềm năng, nhưng hiện tại ở Viêt Nam chưa có kit phát hiện đồng thời hai tác nhân này. Vì vậy trong nghiên cứu này chúng tôi sẽ khảo sát những điều kiện tối ưu để xây dựng quy trình multiplex PCR phát hiện đồng thời HPV và Neisseria gonorrhoeae. Quy trình sau khi được xây dựng thành công có Bảng 1. Kết quả thiết kếhệ primer-probe
Phương pháp multiplex PCR
DNA từ mẫu dịch phết tế” bào âm đạo bệnh nhân được ly trích bằng phương pháp sử dụng phenol/chloroform, phỏng theo phương pháp của Chomczynski & Sacchi (1987): 100 pl dịch tế’ bào được thêm vào 900 pl Trizol. DNA sau đó được tủa bằng Isopropanol với chất trợ tủa
thể được ứng dụng hỗ trợ trong chẩn đoán và điều trị, sẽ rất tiện lợi cho việc phát hiện hai tác nhân gây bệnh ở đường sinh dục người, cũng như góp phần giảm thiểu chi phí trong sàng lọc các bệnh nhiễm ở đường sinh dục.
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất