Xây dựng quy trình PCR đa mồi để xác định mức độ methyl hóa các promoter Wp, Cp và Qp của EBNA1 trên hai dòng tế bào Namalwa và Raji

Protein EBNA1 của EBV được biểu lộ ở tất cả thể tiềm ẩn và sử dụng các promoter khác nhau, bao gồm Wp, Cp và Qp. Sự điều hòa biểu lộ gen EBNA1 do nhiều cơ chế, trong đó có sự methyl hóa cytosin của CpG ở vùng promoter. Mục tiêu nghiên cứu là thiết kế các cặp mồi để xác định mức độ methyl hóa các promoter của gen EBNA1 bằng phản ứng PCR đa mồi, sử dụng các dòng tế bào Namalwa và Raji. Kết quả cho thấy: Hai cặp mồi xác định methyl hóa và không methyl hóa của Wp, Cp và Qp cho kết quả dương tính tốt nhất ở nồng độ ADN tương đương 1000 tế bào Namalwa và Raji. Đối với Cp, hai cặp mồi xác định methyl hóa và không methyl hóa cho Raji đều cho kết quả âm tính. Từ đó ta có thể kết luận: Điều kiện phản ứng PCR đa mồi và các cặp mồi tựthiết kế đặc hiệu với Namalwa và Raji, ngoại trừ Cp của Raji.

Ngày nay, nhờ những tiến bộ của sinh học phân tử người ta có thể xác định được mức độ methyl hóa của một gen đặc hiệu hay toàn bộ bộ gen. Các kỹ thuật này dựa vào những nguyên lý khác nhau, có những kỹ thuật rất phức tạp, nhưng có những kỹ thuật đơn giản và thông dụng [5]. Đã có những công trình xác định mức độ methyl hóa các promoter của EBNA1 bằng phản ứng PCR đơn mồi [6], nhưng chưa có công trình nghiên cứu về PCR đa mồi được công bố, vì vậy công trình này nhằm mục tiêu: Xây dựng quy trình PCR đa mồi để xác định mức độ methyl hóa các promoter Wp, Cp và Qp của EBNA1 trên hai dòng tế bào Namalwa và Raji.