XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHA CHẾ BỘ KIT ĐỊNH LƯỢNG CREATININ TRONG HUYẾT THANH
XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHA CHẾ BỘ KIT ĐỊNH LƯỢNG CREATININ TRONG HUYẾT THANH
Nguyễn Thị Phương Thảo , Trần Thanh Nhãn
TÓM TẮT:
Mở đầu: Việc sản xuất những bộ kit thử dùng cho định lượng các chất trong lĩnh vực xét nghiệm sinh hóa là một vấn đề’đã được giải quyết khá lâu ở các nước châu Ầu, Mỹ, Nhật. Trong khi đó, tại nước ta hiện nay hầu hết các bộ kit dùng trong lĩnh vực này đều phải nhập khẩu. Sản xuất trong nước những bộ kit thử cho các xét nghiệm hóa sinh với chất lượng ổn định, giá thành rẻ là một đòi hỏi cấp thiết
Mục tiêu: Xây dựng quy trình pha chế và tiêu chuẩn hóa bộ kit định lượng creatinin trong huyết thanh.
Phương pháp nghiên cứu: Ứng dụng các phần mềm vi tính (Design-Expert, FormRules, INForm, Microsoft Office Excel) để tôi ưu hoá công thức bộ kit. Sự ổn định của bộ kit được xác định bằng phương pháp tự nhiên và phương pháp lão hóa cấp tốc.
Kết quả: Đề tài đã khảo sát được các thông sô’ tôi ưu của bộ kit. Các thông sô’ tôi ưu như sau: nông độ acid picric = 21,06 mmol/L; nông độ NaOH = 333,55 mmol/L; nông độ creatinin chuẩn = 5,41 mg/dL; thời gian ti = 10 giây; thời gian t2 = 104 giây. Thời hạn sử dụng bộ kit được dự đoán là 42 tháng kể từ khi pha chế ở điều kiện bảo quản mát từ 2 – 8 0C. Bộ kit được sử dụng để định lượng nông độ creatinin trong huyết thanh của 327 bệnh nhân và 21 huyết thanh nội kiểm tra tại phòng sinh hoá, bệnh viện Quận 4, thành phô’ Hô’ Chí Minh và có so sánh thông kê kết quảvớibộ kit ngoạinhập(ISE – Ý) đangsử dụngtại đây. Kết quảcho thấy,bộkit cóchất lượng tương đương với bộ kit ngoại nhập.
Kết luận:Đã thựchiệnđược việctôi ưu hóa công thứcphachế bộ kitđịnhlượngcreatinin trong huyết
ĐẶT VẤN ĐỀ
Bệnh lý về thận là bệnh lý rất thường gặp hiện nay. Một trong những biêu hiện của bệnh là sự tăng nồng độ creatinin trong máu. Do đó việc đinh lượng creatinin trong huyết thanh là một trong những xét nghiệm sinh hóa quan trọng cần được thực hiện để giúp cho việc chẩn đoán sớm và điều trị bệnh có hiệu quả.
Ớ Việt Nam hiện nay, một số’ phòng thí nghiệm của các trường Đại học như Đại học Khoa học Tự nhiên thành phố’ Hồ’ Chí Minh, Đại học Nông nghiệp thành phố’ Hồ’ Chí Minh và của công ty Nam Khoa có nghiên cứu sản xuất các bộ kit thử, nhưng chủ yếu dùng trong sinh học phân tử nhằm xác đinh các tác nhân gây bệnh trên người và động vật như: bộ kit PCR (Polymerase Chain Reaction) chẩn đoán lao, PCR chẩn đoán sốt xuất huyết, PCR chẩn đoán thương hàn, PCR chẩn đoán bệnh đốm trắng cho tôm, … Việc nghiên cứu sản xuất các bộ kit dùng trong xét nghiệm hóa sinh cho đến nay hầu như chưa được quan tâm. Bộ môn Sinh Hóa – Độc Chất, khoa Dược Đại học Y Dược thành phố’ Hồ’ Chí Minh trong 3 năm gần đây đã đi theo hướng nghiên cứu này.
Trong lĩnh vực xét nghiệm hóa sinh lâm sàng, hầu hết các phòng xét nghiệm đều sử dụng các bộ kit ngoại nhập. Đó là một trong những nguyên nhân làm tăng giá thành các xét nghiệm, đồng thời làm tăng thêm gánh nặng điều trị cho bệnh nhân. Việc sản xuất trong nước những bộ kit cho các xét nghiệm hóa sinh với chất lượng ổn đinh, giá thành rẻ là một đòi hỏi
cấp thiết. Xuất phát từ tình hình trên, chúng tôi thực hiện nghiên cứu này với mục tiêu xây dựng quy trình pha chế và tiêu chuẩn hóa bộ kit đinh lượng creatinin trong huyết thanh.
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất