Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng tăng cường khả năng sinh tinh của cao đặc Testin CT3 trên động vật thực nghiệm

by

Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng tăng cường khả năng sinh tinh của cao đặc Testin CT3 trên động vật thực nghiệm

Luận án tiến sĩ y học Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng tăng cường khả năng sinh tinh của cao đặc Testin CT3 trên động vật thực nghiệm.Xã hội ngày một phát triển nhưng kèm theo công nghiệp hóa, hiện đại hóa làm ô nhiễm môi trường, stress, lạm dụng hóa chất… Những yếu tố đó tác động trực tiếp hoặc gián tiếp lên quá trình sản sinh và trưởng thành của tinh trùng, khiến cơ chế bệnh sinh của suy giảm tinh trùng rất phức tạp.

    Khả năng sinh sản của nam giới thông qua sự sản sinh tinh dịch bao gồm tinh trùng có chất lượng và bình thường về số lượng, phù hợp với mong muốn và khả năng giao phối [1]. Có rất nhiều lý do dẫn đến xuất hiện vô sinh ở nam giới như rối loạn di truyền, tắc nghẽn hay biến dạng ống sinh tinh, giảm sản xuất tinh trùng, giảm chất lượng các thông số tinh dịch, rối loạn chức năng cương dương và bệnh liệt dương [2]. Nhiều nghiên cứu đã cho thấy các thông số tinh dịch ở 25 – 40% nam thanh niên thấp hơn so với tiêu chuẩn của Tổ chức Y tế Thế giới [3]. Nồng độ tinh trùng thấp là nguyên nhân dẫn đến vô sinh ở nam giới [4]. Trong đó suy giảm tinh trùng là một trong những nguyên nhân trực tiếp gây vô sinh. Tình trạng suy giảm tinh trùng ngày nay có xu hướng gia tăng, tuy không gây nguy hiểm và không phải là bệnh lý cấp tính cần xử trí ngay, nhưng ảnh hưởng nhiều đến tâm lý cũng như giảm chất lượng cuộc sống hàng ngày của bệnh nhân. Hiện nay, việc điều trị suy giảm tinh trùng còn gặp nhiều khó khăn do cơ chế bệnh phức tạp, nên mặc dù có nhiều phương pháp điều trị được đưa ra nhưng kết quả còn hạn chế theo từng nguyên nhân.
    Các phương pháp điều trị theo y học hiện đại đã có nhiều thành tựu trong điều trị suy giảm tinh trùng và mang lại một số kết quả nhất định trong cải thiện triệu chứng cũng như chất lượng cuộc sống cho bệnh nhân, nhưng kết quả không ổn định và có nhiều tác dụng không mong muốn. Các phương pháp điều trị khác nhau như phẫu thuật, hóa chất, thuốc y học cổ truyền sẵn có đều có thể giúp tăng cường khả năng sinh sản. Hiện nay, trên thế giới cũng như ở Việt Nam có xu hướng nghiên cứu các thuốc có nguồn gốc từ dược liệu. Theo nhiều nghiên cứu, thuốc có nguồn gốc từ dược liệu có ảnh hưởng tích cực đến các thông số tinh trùng [5]. Vì vậy, việc sử dụng các phương thuốc y học cổ truyền trong điều trị suy giảm tinh trùng đã và đang được quan tâm. Các bài thuốc Y học cổ truyền là một trong những phương pháp chữa suy giảm tinh trùng có hiệu quả trên thực tế.
    Cao đặc Testin CT3 (công thức 3) gồm 8 vị dược liệu: bá bệnh, dâm dương hoắc, ba kích, xà sàng tử, bạch tật lê, hoàng kỳ, đương quy, câu kỷ tử. Testin CT3 được thiết kế dựa trên cơ sở lý luận và biện chứng của Y học cổ truyền, có tác dụng bổ thận, sinh tinh, ích khí huyết, điều trị suy giảm chức năng sinh dục nam. Sản phẩm trong nghiên cứu này được bào chế dưới dạng cao đặc với mục đích kết hợp các dược liệu trên sẽ tạo ra tác dụng mạnh hơn và ít độc tính hơn. Do đó để góp phần tạo tiền đề nghiên cứu phát triển bài thuốc này trên thực tiễn, đề tài: “Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng tăng cường khả năng sinh tinh của cao đặc Testin CT3 trên động vật thực nghiệm” được thực hiện nhằm 2 mục tiêu:
1.    Xác định được độc tính cấp, độc tính bán trường diễn, độc tính sinh sản và phát triển của cao đặc Testin CT3.
2.    Đánh giá được tác dụng tăng cường khả năng sinh tinh của cao đặc Testin CT3 trên mô hình gây suy giảm sinh sản chuột đực thực nghiệm. 

MỤC LỤC
Trang phụ bìa
Lời cam đoan
Mục lục
Danh mục các chữ viết tắt
Danh mục bảng
Danh mục biểu đồ
Danh mục hình
ĐẶT VẤN ĐỀ    1
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN    3
1.1. Quá trình sinh tinh    3
1.2. Những yếu tố ảnh hưởng tới quá trình sinh tinh trùng    6
1.2.1. Điều hòa nội tiết trong quá trình sinh tinh    6
1.2.2. Nhiệt độ    7
1.2.3. Yếu tố di truyền    8
1.2.4. Béo phì    9
1.2.5. Bệnh đái tháo đường    10
1.2.6. Hóa chất môi trường    10
1.2.7. Nhiễm trùng    11
1.3. So sánh giải phẫu, mô học cơ quan sinh dục giữa người và chuột    11
1.3.1. Tinh hoàn    12
1.3.2. Ống dẫn tinh    14
1.3.3. Túi tinh    15
1.3.4. Tuyến tiền liệt    16
1.3.5. Tuyến hành niệu đạo    18
1.3.6. Tuyến bao quy đầu    19
1.3.7. Niệu đạo    20
1.3.8. Dương vật    22
1.3. Một số mô hình nghiên cứu tác dụng trên sinh sản nam và phương pháp đánh giá chức năng sinh sản nam bằng mô hình in vitro    22
1.3.1. Mô hình gây suy giảm sinh sản trên động vật thực nghiệm    23
1.3.2. Một số mô hình nghiên cứu tác dụng trên chức năng sinh sản nam    28
1.3.3. Phương pháp đánh giá chức năng sinh sản bằng mô hình in vitro    32
1.4. Tình hình nghiên cứu các dược liệu trong Testin CT3    34
1.4.1. Bá bệnh    36
1.4.2. Dâm dương hoắc    36
1.4.3. Ba kích    38
1.4.4. Xà sàng tử    38
1.4.5. Bạch tật lê    39
1.4.6. Hoàng kỳ    40
1.4.7. Đương quy    41
1.4.8. Câu kỷ tử    41
1.4.9. Tình hình nghiên cứu tại Việt Nam    42
CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU    44
2.1. Chất liệu nghiên cứu    44
2.2. Đối tượng nghiên cứu    46
2.2.1. Nghiên cứu tính an toàn    46
2.2.2. Đánh giá tác dụng    46
2.3. Phương pháp nghiên cứu    47
2.3.1. Nghiên cứu tính an toàn của Testin CT3    48
2.3.2. Nghiên cứu đánh giá tác dụng của Testin CT3    53
2.3.3. Kỹ thuật cho động vật uống thuốc    66
2.4. Xử lý số liệu    68
2.5. Địa điểm nghiên cứu    68

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU    69
3.1. Kết quả nghiên cứu tính an toàn của cao đặc Testin CT3    69
3.1.1. Kết quả nghiên cứu độc tính cấp của Testin CT3    69
3.1.2. Kết quả nghiên cứu độc tính bán trường diễn của Testin CT3    70
3.1.3. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của Testin CT3 trên quá trình sinh sản và phát triển qua các thế hệ    81
3.2. Đánh giá tác dụng của Testin CT3    84
3.2.1. Trên mô hình chuột cống gây suy giảm sinh sản bằng stress nhiệt    84
3.2.2. Tác dụng của Testin CT3 trên chuột nhắt gây suy giảm sinh sản bằng stress giam giữ    92
3.2.3. Kết quả đánh giá hoạt tính androgen của cao đặc Testin CT3    101
CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN    104
4.1. Tính an toàn của cao đặc Testin CT3    104
4.1.1. Độc tính cấp của Testin CT3    104
4.1.2. Độc tính bán trường diễn    108
4.1.3. Độc tính trên sinh sản và phát triển    114
4.2. Tác dụng của cao đặc Testin CT3    117
4.2.1. Tác dụng của cao đặc Testin CT3 trên mô hình gây suy giảm sinh sản bằng stress nhiệt    118
4.2.2. Tác dụng của Testin CT3 trên mô hình gây suy giảm sinh sản bằng stress giam giữ    133
4.2.3. Hoạt tính androgen của Testin CT3    140
KẾT LUẬN    146
KIẾN NGHỊ    148
DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN
TÀI LIỆU THAM KHẢO
PHỤ LỤC

DANH MỤC BẢNG

Bảng    Tên bảng    Trang

2.1.     Thang điểm Johnsen    56
2.2.     Thang điểm Mustafa    62
3.1.     Kết quả đánh giá độc tính cấp của Testin CT3    69
3.2.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến trọng lượng cơ thể thỏ    71
3.3.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến số lượng hồng cầu thỏ    72
3.4.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến huyết sắc tố    73
3.5.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến số lượng bạch cầu thỏ    74
3.6.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến số lượng tiểu cầu    75
3.7.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến hoạt độ AST    76
3.8.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến hoạt độ ALT    77
3.9.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến nồng độ ure    78
3.10.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến creatinin    79
3.11.     Chỉ số phôi thai của thế hệ P mang thai F1    82
3.12.     Chỉ số phôi thai của thế hệ F1 mang thai F2    83
3.13.     Ảnh hưởng Testin CT3 đến sự sinh con thế hệ P    83
3.14.     Ảnh hưởng Testin CT3 đến sự sinh con thế hệ F1    84
3.15.     Ảnh hưởng đến trọng lượng trên mô hình stress nhiệt    84
3.16.     Tác dụng của Testin CT3 lên trọng lượng cơ quan sinh dục chuột suy giảm sinh sản bằng stress nhiệt    85
3.17.     Tác dụng Testin CT3 đối với mức độ di động của tinh trùng    87
3.18.     Ảnh hưởng của Testin CT3 tới trọng lượng cơ thể chuột trên mô hình gây suy giảm sinh sản bằng stress giam giữ    92
3.19.     Tác dụng của Testin CT3 lên trọng lượng tinh hoàn, túi tinh chuột gây suy giảm sinh sản bằng stress giam giữ    93
3.20.     Tác dụng của Testin CT3 lên trọng lượng tuyến tiền liệt, tuyến Cowper, cơ nâng hậu môn trên mô hình stress giam giữ    94
3.21.     Tác dụng của Testin CT3 đến kích thước ống sinh tinh    95
3.22.     Đánh giá ống sinh tinh theo thang điểm Mustafa    98
3.23.     Ảnh hưởng của Testin CT3 đến trọng lượng chuột trong nghiên cứu đánh giá hoạt tính androgen    101
3.24.     Ảnh hưởng Testin CT3 đến trọng lượng quy đầu, tuyến tiền liệt trong nghiên cứu đánh giá hoạt tính androgen    102
3.25.     Ảnh hưởng Testin CT3 đến trọng lượng túi tinh, tuyến Cowper, cơ nâng hậu môn trong đánh giá hoạt tính androgen    103
 
DANH MỤC BIỂU ĐỒ

Biểu đồ    Tên biểu đồ    Trang

3.1.     Mối tương quan giữa liều dùng và tỷ lệ chuột chết trong 72h    70
3.2.     Ảnh hưởng của Testin CT3 lên khả năng mang thai    81
3.3.     Ảnh hưởng Testin CT3 đến số lượng tinh trùng    86
3.4.     Nồng độ testosteron    88
3.5.     Tỷ lệ nhóm điểm theo Johnsen    89
3.6.     Biểu đồ Boxplot phân bố điểm Johnsen    90
3.7.     Biểu đồ Boxplot phân bố điểm Mustafa của 4 lô nghiên cứu    99
3.8.     Tỷ lệ nhóm điểm theoMustafa    100

DANH MỤC HÌNH

Hình    Tên hình    Trang

1.1.     Mặt cắt ngang ống dẫn tinh    3
1.2.     Quá trình sinh tinh    4
1.3.     Hệ thống sinh sản chuột đực (A) và người (B)    12
1.4.     Tinh hoàn chuột đực (A) và tinh hoàn người (B)    13
1.5.     Ống sinh tinh chuột (A) và người (B)    14
1.6.     Tuyến tiền liệt chuột    17
1.7.     Tuyến hành niệu đạo chuột    19
1.8.     Giải phẫu vùng tuyến bao quy đầu chuột    20
1.9.     Niệu đạo dương vật (A) và niệu đạo màng (B)    21
1.10.     Dương vật chuột    22
2.1.     Tóm tắt quy trình sản xuất Testin CT3    45
2.2.     Sơ đồ các bước nghiên cứu    47
2.3.     Sơ đồ nghiên cứu độc tính cấp của Testin CT3    49
2.4.     Sơ đồ nghiên cứu độc tính bán trường diễn Testin CT3    51
2.5.     Gây tổn thương tinh hoàn bằng ngâm vào nước nóng 42ºC    53
2.6.     Sơ đồ nghiên cứu theo mô hình stress nhiệt    55
2.7.     Bình ổn nhiệt vạn năng    57
2.8.     Buồng đếm Makler    58
2.9.     Máy bách phân bạch cầu    58
2.10.     Gây suy giảm sinh sản chuột bằng stress giam giữ    60
2.11.     Sơ đồ nghiên cứu theo mô hình stress giam giữ    61
2.12.     Sơ đồ nghiên cứu hoạt tính androgen    66
2.14.     Kim cho chuột nhắt và chuột cống uống thuốc    67
2.15.     Quy trình cho chuột uống thuốc    68
3.1.     Ảnh mô bệnh học gan thỏ thực nghiệm    80
3.2.     Ảnh mô bệnh học thận thỏ thực nghiệm    80
3.3.     Ảnh mô bệnh học lách thỏ thực nghiệm    80
3.4.     Điểm Johnsen đánh giá ống sinh tinh qua mặt cắt ngang    91
3.5.     Kích thước OST và lòng OST lô chứng    96
3.6.     Kích thước OST và lòng OST lô mô hình    96
3.7.     Kích thước OST và lòng OST lô trị 1    97
3.8.     Kích thước OST và lòng OST lô trị 2    97
3.9.     Điểm đánh giá ống sinh tinh qua mặt cắt ngang    101

Leave a Comment