Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng Isoniazid trong huyết tương bằng phương pháp sắc ký lỏng kết hợp dẫn xuất hóa trước cột với Cinnamaldehyd

Ứng dụng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xây dựng quy trình và thẩm định phương pháp định lượng isoniazid (INH) trong huyết tương người. Phương pháp xử lý mẫu: tủa protein  huyết tương bằng acetonitril, sau đó lọc. Lấy 200  ?l dịch lọc, thêm 20  ?l  H
2 O, 2,0  ?l dung dịch axit  tricloacetic 10%, 40  ?l dung dịch cinnamaldehyd 1% trong methanol, lắc xoáy 1 phút, để yên 9 phút  và tiêm mẫu vào máy HPLC để phân tích.
Điều kiện sắc ký:
Pha tĩnh: zorbax SB-CN (150 mm x 4,6 mm; 5 ?m); với bảo vệ cột: 8 mm x 4,6 mm; 5 ?m.
Pha động: methanol – dung d?ch natri acetat 5 mM – dung d?ch axit acetic bang (42:57:1).
– Tốc độ dòng: 1,5 ml/phút.
– Thể tích mẫu tiêm: 20 ?l.
– Detector UV, b-ớc sóng phát hiện: 330 nm.
Ph-ơng pháp đ-ợc thẩm định đầy đủ về tính chọn lọc, khoảng tuyến tính, giới hạn định l-ợng, độ  chính xác, độ đúng theo h-ớng dẫn của FDA; tiến hành đơn giản, nhanh,  với độ tin cậy đảm bảo, có  thể ứng dụng để định l-ợng INH trong huyết t-ơng bệnh nhân (BN) lao.

Trong những năm gần đây, tại Việt Nam  đã  áp dụng xác  định nồng  độ thuốc chống  lao  trong  huyết  tương  để  đánh  giá  d-ợc  động  học  và  sinh  khả  dụng  rifampicin  (RMP),  isoniazid  (INH),  pyrazinamid  (PZA)  là  những  thuốc  chống  lao  thiết  yếu  dùng  đồng  thời  trong  phác  đồ  điều  trị  bệnh  lao.
Do  nồng  độ  INH  trong  huyết  tương  BN  rất thấp,  cần  phải  xây  dựng  quy  trình  định  lượng bằng HPLC kết hợp dẫn xuất hóa để  tăng  khả  năng  phát  hiện  INH  trong  huyết  t-ơng.
Trong bài báo này, chúng tôi công bố kết  quả  nghiên  cứu  quy  trình  và  thẩm  định
ph-ơng  pháp  định  l-ợng  INH  trong  huyết  tương bằng HPLC