NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG TẤM MÀNG ỐI ĐÔNG KHÔ LÀM GIÁ THỂ TRONG NUÔI CẤY TẾ BÀO GỐC
Sử dụng tấm màng ối đông khô để nuôi cấy tế bào gốc (TBG) màng ối với mục tiêu ứng dụng màng ối đông khô làm giá thể sinh học nuôi cấy tế bào (TB), đồng thời bước đầu nghiên cứu ảnh hưởng của giá thể màng ối lên khả năng tăng sinh và biệt hóa TB. Tấm màng ối đông khô được “làm ướt” trở lại bằng dung dịch PBS, sau đó dàn lên đáy đĩa nuôi cấy. Nhỏ và trải đều TBG màng ối lên bề mặt tấm màng ối. Nuôi cấy TBG màng ối trong môi trường DMEM và 10% huyết thanh bào thai bê. Thu hoạch TB nuôi cấy trên tấm bằng dung dịch trypsin 0,25%. Đo sự tăng sinh TB theo phươngpháp MTS và xác định tính gốc của TB bằng dấu ấn OCT-4. Kết quả: TBG màng ối phát triển tốt trên màng ối đông khô được “làm ướt”, đồng thời vẫn giữ nguyên được biểu hiện OCT-4. Như vậy, sử dụng màng ối đông khô làm giá thể để nuôi cấy TBG màng ối giúp TB tăng sinh và duy trì được tính gốc ban đầu
Điều kiện tiên quyết cho việc lựa chọn giá đỡ là tính phù hợp về mặt sinh học của nó, tức thích hợp với tổ chức sống, khôngđộc, không gây ung thư hoặc không kích thích sinh miễn dịch trong cơ thể sống. Giá đỡ không bị phá hủy bởi quá trình viêm nên có thể sử dụng để cấy ghép. Ngoài ra, giá đỡ cần có tính chất cơ học phù hợp với mô, bao gồm tính thấm, tính ổn định, độ đàn hồi, tính linh hoạt và dễ dàng lấy bỏ khi cần [1].Giá đỡ cũng cần cho phép TB bám dính và khả năng thấm qua dễ dàng các chất như yếu tố sinh trưởng và vật liệu di truyền [2].
Màng ối là một giá đỡ với mô hình cấu trúc tương tự như chất gian bào trong tổ chức, cơ quan. TB biểu mô màng ối tiết ra các thành phần ngoại bào collagen týp III, IV và glycoprotein khác như laminin, nidogen, fibronectin tạo nên màng nền của màng ối. Lớp xốp trên màng ối là những proteoglycan ưa nước và glycoprotein chứa các mạng lưới gồm chủ yếu collagen týp III. Perlecan – một heparan sulphate proteoglycan, là thành phần chủ yếu của màng nền, gắn các yếu tố sinh trưởng với protein ngoại bào và phân tử bám dính
Hy vọng sẽ giúp ích cho các bạn, cũng như mở ra con đường nghiên cứu, tiếp cận được luồng thông tin hữu ích và chính xác nhất